Comparison of elastase secretion using ultrasensitive fluorescent probes by human and mouse neutrophils in the presence of P. gingivalis

Elastaza neutrofilowa jest enzymem produkowanym przez neutrofile, którego sekrecja stanowi jeden z licznych mechanizmów odpornościowych wywołanych stymulacją czynnikami patogennymi w tym bakterią z gatunku Porphyromonas gingivalis, stanowiącą jeden z głównych czynników wpływających na rozwój przewlekłego zapalenia przyzębia. W celu pomiaru aktywności wydzielonej elastazy przez neutrofile ludzkie i mysie pod wpływem P. gingivalis posłużono się pomiarem intensywności fluorescencji oraz absorbancji. Obie metody są specyficzne w stosunku do wykrywanego enzymu natomiast dokładniejszy obraz wydzielonej elastazy przez neutrofile otrzymano dzięki zastosowaniu ultraczułej sondy fluorescencyjnej. Zarejestrowany pomiar wykazał, iż emisja fluorescencji jest kilkadziesiąt razy większa w przypadku zastosowania neutrofili ludzkich niż w przypadku użycia neutrofili mysich. Wskazuje to na różnice w funkcjonowaniu neutrofili u obu gatunków w szczególności mechanizmy odpowiedzialne mechanizmy obronne neutrofili, do których należy sekrecja elastazy.

Elastase is an enzyme produced by neutrophils, the secretion of which is one of the numerous immune mechanisms caused by stimulation by pathogenic factors, including Porphyromonas gingivalis, which is one of the main factors contributing to development of chronic periodontal disease. To measure the activity of secreted elastase by human and mouse neutrophils in the presence of P. gingivalis techniques based on measurement of fluorescence intensity and absorbance were used. Both methods are specific to the detected enzyme, while a more accurate picture of the elastase secreted by neutrophils was obtained by using an ultrasensitive fluorescent probe. The recorded measurement showed that the fluorescence emission is several dozen times higher in the case of using human neutrophils than in the case of using mouse neutrophils. Which indicates differences in the functioning of neutrophils in both species, in particular the mechanisms responsible for the defense mechanisms of neutrophils which includes secretion of elastase.