Investigating the safety of a new compound with anti-epileptic activity.

Celem pracy była ocena bezpieczeństwa nowego związku o akronimie AW12, o działaniu przeciwpadaczkowym, z zastosowaniem analizy in silico oraz badań in vivo u szczurów, osobników żeńskich, szczepu Wistar wraz z oznaczeniami biochemicznymi i immunologicznymi w osoczu szczura. Związek opracowano i zsyntetyzowano w Zakładzie Chemii Bioorganicznej, Katedry Chemii Organicznej Wydziału Farmaceutycznego CMUJ. Analizę in silico podzielono na dwie części. W pierwszej części przewidywano parametry toksykometryczne związku z zastosowaniem programu ADMET Predictor, natomiast w drugiej części przewidywano potencjalne metabolity związku AW12, z zastosowaniem programów ADMET Predictor, Pallas CompuDrug oraz MetaSite.Wyniki uzyskane za pomocą programu ADMET Predictor wykazały, że związek wykazuje prawdopodobne działanie hepatotoksyczne – wysokie stężenie enzymów, takich jak GTP oraz ALP.Badanie toksyczności ostrej in vivo zgodnie z procedurą OECD 420 wykazało, że związek AW12 należy do 4 klasy wg GHS (wartość LD50 300 mg/kg - 2000 mg/kg), co wskazuje, iż związek ten może być szkodliwy po połknięciu. Pokrywa się to z wynikiem otrzymanym w analizie in silico.Wyniki analiz biochemicznych potwierdziły zwiększone stężenie enzymów GTP oraz ALP u szczura, po dożołądkowym podaniu związku, w dawce 2000 mg/kg. Podobnie, badania immunologiczne wykazały zwiększenie ilości enzymów wątrobowych, takich jak SDH oraz GST u jednego szczura, natomiast u pozostałych 3 zwierząt, stężenie enzymów wątrobowych nie różniło się od zakresów referencyjnych. Uzyskane wyniki wskazują, iż związek AW12 jest bezpieczny po podaniu dożołądkowym w dawce niższej od 2000 mg/kg i może być przedmiotem badań w dalszych etapach oceny bezpieczeństwa.

The aim of this study was to investigate the safety of a new compound with acronym AW12, with anti-epileptic activity, using in silico and in vivo studies in rats, female, the Wistar strain, with biochemical and immunological assays performed in rat plasma. The compound was developed and synthesised at the Department of Bioorganic Chemistry, Department of Organic Chemistry, Faculty of Pharmacy, UJ CM. In the first part of in silico analysis, toxicometric parameters of the compound were predicted using ADMET Predictor, while in the second part, potential metabolites of compound were predicted using ADMET Predictor, Pallas CompuDrug and MetaSite.The high levels of GTP and ALP enzymes predicted by the ADMET Predictor indicated a likely hepatotoxic effect of compound AW12. An acute toxicity study in line with the OECD 420 procedure, showed that the compound belongs to class 4 according to the GHS (LD50 300 mg/kg - 2000 mg/kg), indicating harmfulness when swallowing. The result is the same in the in silico analysis.The results of biochemical analyses indicated an increase in the concentration of PGD and ALP in the rat, following administration of 2000 mg/kg. Similarly, immunological studies showed increased liver enzymes such as SDH and GST in one rat, whereas in the other 3 animals, liver enzyme concentrations did not differ from the reference ranges.The results obtained indicate that compound AW12 is safe when administered intragastrically at a dose lower than 2000 mg/kg and may be investigated in further stages of safety assessment.