Experimental models for studying the function of neutrophils

Neutrofile to najliczniejsza grupa krwinek białych, krążących w krwi obwodowej człowieka. Stanowią pierwszą linię obrony organizmu, przeciwdziałając wnikającym drobnoustrojom chorobotwórczym, co jest możliwe dzięki mechanizmom bójczym, jakie wykorzystują te komórki. Neutrofile są komórkami bardzo krótko żyjącymi, dożywającymi w warunkach hodowlanych 24-48h, po czym spontanicznie ulegają apoptozie. Cecha ta sprawia, że neutrofile sprawiają trudności w wykorzystywaniu ich do badań doświadczalnych. Z tej przyczyny brakuje użytecznych modeli doświadczalnych, które mogłyby być używane do badania funkcji neutrofili. Linia HL-60 to linia komórkowa ostrej białaczki promielocytowej. Powodem rozwoju tej choroby jest klonalna proliferacja komórek nowotworowych, których dojrzewanie jest zahamowane na etapie promielocyta. Linia ta budzi nadzieje na możliwość wykorzystania jej jako modelu do badania różnicowania komórek szpikowych w kierunku monocytów, makrofagów lecz również granulocytów. Stosując odpowiednie odczynniki indukujące komórki tej linii są zdolne do wkroczenia na wybraną ścieżkę różnicowania. Niniejsza praca jest próbą porównania obecnie stosowanych modeli doświadczalnych do badania funkcji neutrofili oraz próbą opracowania modelu doświadczalnego, który mógłby stanowić alternatywę do modeli już istniejących. W tym celu podjęto próbę różnicowania komórek linii HL-60 w kierunku neutrofili, używając do tego celu kwasu All-trans retinowego (ATRA) oraz dimetylosulfotlenku (DMSO).

Neutrophils are the most numerous group of white blood cells circulating in the human peripheral blood. Neutrophils are the body's first line of defense. They counteract penetrating pathogenic microorganisms, which is possible thanks to the killing mechanisms that these cells use.Neutrophils are very short-lived cells that live 24-48 hours under culture conditions. This feature makes neutrophils difficult to use in experimental research. For this reason, there are no useful experimental models that could be used to study the function of neutrophils.The HL-60 line is an acute promyelocytic leukemia cell line. The reason for the development of this disease is the clonal proliferation of neoplastic cells, the maturation of which is inhibited at the promyelocyte stage. This line can be used to test the differentiation of myeloid cells into monocytes, macrophages but also granulocytes. This experiment is an attempt to compare the currently used experimental models to study the function of neutrophils and an attempt to develop an experimental model that could be an alternative to the existing ones. For this purpose, an attempt was made to differentiate HL-60 cells towards neutrophils using All-trans retinoic acid (ATRA) and dimethyl sulfoxide (DMSO).