Influence of calcium ions and confluence of squamous cell carcinoma cell line A431 on transcript and protein level of MCPIP1

Głównym regulatorem różnicowania komórek naskórka jest wapń. Jony wapnia wpływają na obniżenie potencjału proliferacyjnego, zahamowanie migracji komórek oraz przyspieszenie procesów różnicowania. Białko MCPIP1 bierze udział podczas różnicowania wielu typów komórek, w tym keratynocytów pierwotnych oraz komórek linii HaCaT. Komórki płaskonabłonkowego raka naskórka inkubowano z jonami wapnia o stężeniu 1,8 mM przez 24h, 48h i 72h, a następnie sprawdzano zmiany MCPIP1 na poziomie białka metodą Western blot i na poziomie transkryptu metodą qRT-PCR. Podczas długich inkubacji komórek zwiększa się ich konfluencja, dlatego też badano sam proces wzrostu konfluencji na zmiany poziomu białka MCPIP1. Uzyskane wyniki wskazują, że poziom białka MCPIP1 (formy 66 kDa i 36 kDa) spada natomiast poziom transkryptu rośnie wraz z wydłużającym się czasem inkubacji z jonami wapnia,. Przy wzrastającej konfluencji komórek, poziom białka MCPIP1 (66 kDa) zwiększa się, natomiast poziom mniejszej formy białka (36 kDa) maleje.

The main regulator of epidermal cell differentiation is calcium. Calcium ions reduce proliferative capacity, inhibit cell migration, and accelerate differentiation processes. The MCPIP1 protein is involved in the differentiation of many cell types, including primary keratinocytes and HaCaT cells.Squamous cell carcinoma cells were incubated with 1.8mM calcium ions for 24h, 48h, and 72h, and then MCPIP1 changes were monitored at the protein level by the Western blot method and at the transcript level by the qRT-PCR method. During long incubation of cells, their confluence is increased, therefore the confluence growth process was investigated for changes in MCPIP1 protein level. The results showed that the level of MCPIP1 (66 kDa and 36 kDa forms) decrease while the level of transcript increases with the longer incubation time with calcium ions. During the increasing cell confluence, the level of the MCPIP1 protein (66 kDa) increases while the level of the smaller protein form (36 kDa) decreases.