Determination of markers of the oxidative stress influenced by inhibitors of selected transporters from the SLC6 family

Przedmiotem niniejszej pracy było oznaczenie markerów stresu oksydacyjnego pod wpływem inhibitorów wybranych transporterów SLC6.Reaktywne formy tlenu (RFT, ang. ROS, Reactive Oxygen Species) są ubocznymi produktami metabolizmu tlenowego. Powstają w wyniku fizjologicznych przemian metabolicznych i pełnią wiele ważnych dla organizmu funkcji. Zaburzenie równowagi pomiędzy generowaniem a usuwaniem RFT nazywane jest stresem oksydacyjnym. Ochronę organizmu przed negatywnymi skutkami RFT spełniają związki antyoksydacyjne.Transportery SLC6 jest to grupa przenośników dla neurotransmiterów głównie w OUN. Inhibitory SLC6 GABA znalazły zastosowanie w leczeniu padaczki, są ciągle także przedmiotem badań w poszukiwaniu nowych możliwości ich wykorzystania w terapii.Wybrane inhibitory transporterów SLC6 poddano analizie z wykorzystaniem metody in vitro: metody redukcji kationorodnika ABTS•+ oraz metod in vivo: metody PMS-NADH do oznaczania aktywności dysmutazy ponadtlenkowej i metody Ellmana do oznaczania stężenia glutationu zredukowanego.Otrzymane wyniki są niejednoznaczne. W testach in vitro badane związki w wysokich stężeniach wykazały działanie prooksydacyjne, natomiast w niskich antyoksydacyjne. Następnie testom in vivo poddane zostały dwa związki, w tym jeden biorący wcześniej udział w teście in vitro. Na skutek ich podawania nastąpiło zmniejszenie aktywności dysmutazy ponadtlenkowej oraz zmniejszenie ilości zredukowanego glutationu w wątrobie myszy, w stosunku do grupy kontrolnej.Rezultaty te wskazują na działanie prooksydacyjne związków poddanych badaniom, jednakże na obecnym etapie badań nie da się z całkowitą pewnością określić roli wybranych inhibitorów SLC6 w procesie stresu oksydacyjnego.

The subject of this study was to determine markers of oxidative stress under the influence of inhibitors of selected transporters SLC6.Reactive oxygen species (ROS) are by-products of aerobic metabolism. They arise as a result of physiological metabolism and have many important body functions. The imbalance between the generation and the removal of ROS is called oxidative stress. Antioxidant compounds protect the body against the harmful effects of ROS.Transporters SLC6 are a group of carriers for the neurotransmitters mainly in the CNS. SLC6 GABA inhibitors are used in the treatment of epilepsy, and still are being studied in the search for new possibilities of their use in the treatment of other diseases.The selected inhibitors of transporters SLC6 was analyzed using in vitro method: a method of reduction of the radical monocation ABTS•+ and in vivo methods: the method PMS-NADH for determining activity of superoxide dismutase and the Ellman method for determining concentration of reduced glutathione.The results are inconclusive. In in vitro tests the tested compounds at high concentrations showed a prooxidative activity, and at low concentrations antioxidant activity. Then, two compounds were tested in vivo, one of which has been previously tested in vitro. As a result of their administration superoxide dismutase activity decreased as well as did the amount of reduced glutathione in the liver of mice, relative to the control group. These results indicate prooxidative activity of the examined compounds.Although, in general the results of in vitro and in vivo confirm each other, however, at the present stage of research one can not determine with absolute certainty the role of selected inhibitors SLC6 in the process of oxidative stress.