Morphometric evaluation of lymphocytic infiltration in mucosal biopsies of patients with suspected Sjögren's syndrome.

Celem mojej pracy jest ponowna ocena nacieków limfocytarnych wewnątrz drobnych gruczołów ślinowych w śluzówce wargi, które zostały pobrane w celu diagnozy zespołu Sjögrena i wcześniej rutynowo ocenione przez patologów. Biopsja jest jedną z najważniejszych metod diagnozowania zespołu Sjögrena. Kryteria oceny tego materiału wraz z definicją focus score zostały opracowane przez American European Consensus Group w 2002 roku i nadal są stosowane na całym świecie. Focus score (FS) jest zdefiniowany jako liczba loci zawierających ≥ 50 komórek (limfocytów, plazmocytów) liczona w stosunki do „jednostkowego” pola powierzchni gruczołu w skrawku histologicznym równym 4 mm2. Nacieki limfocytarne powinny występować obok prawidłowego utkania ślinianki. FS ≥ 1, sugeruje wystąpienie zespołu Sjögrena. Pobieranie biopsji w taki sposób, aby dostarczyć optymalną ilość gruczołu, jest punktem krytycznym dla powodzenia postępowania, które ma na celu patologiczną ocenę focus score. Obszar ślinianki na histologicznym skrawku śluzówki można uznać jako wskaźnik wartości diagnostycznej materiału z biopsji. Dlatego też wykorzystałam metodę morfometryczną do precyzyjnego pomiaru pola powierzchni gruczołów ślinowych. Do ponownej oceny bioptatów, w których patolodzy wcześniej ocenili focus score wykorzystałam moją własną wersję focus score, którą nazwano „morphometric focus index” (MFI), zdefiniowany jako liczba loci zawierająca ≥ 50 limfocytów w przeliczeniu na obszar ślinianki wyrażony w mm2. Ponadto zliczono całkowitą liczbę limfocytów na powierzchni badanych gruczołów. Materiałem była seria (79) biopsji śluzówki wargi wykonana u pacjentów z podejrzeniem zespołu Sjögrena w Uniwersyteckiej Klinice Stomatologii i oceniona histopatologicznie w Katedrze Patomorfologii Collegium Medicum Uniwersytetu Jagiellońskiego. Główne rezultaty i wnioski, które otrzymano były następujące:1. Istnieje słaba dodatnia korelacja między focus score, a analogicznym do niego ustalonym indeksem – MFI (morphometric focus index).2. Zakładając, że zarówno focus score, jak i określony przeze mnie MFI, mogą być uznane jako mierniki intensywności procesu chorobowego i próbując odnieść tą intensywność procesu chorobowego do wieku, moje badania wykazały, że w przypadku focus score nie wykazano takiej zależności, natomiast wykazano ją w przypadku MFI. Może to sugerować, że MFI inaczej (a być może lepiej), ocenia intensywność procesu chorobowego niż focus score. 3. Wykazano słabą dodatnią korelację pomiędzy focus score, a całkowitą gęstością limfocytów w bioptacie ślinianki. 4. Obecnie stosowana metoda diagnostyki choroby Sjögrena w oparciu o badanie histopatologiczne bioptatu z dolnej wargi, wymaga dalszych wysiłków zmierzających do maksymalnej redukcji przypadków pobierania zbyt drobnego materiału. Być może pożądane byłoby wspomaganie procedury pobrania bioptatu badaniem USG, jeśli jest to technicznie wykonalne.

The aim of my work is morphometric reevaluation of reactive lymphocytic infiltrations within small mucosal salivary glands in lips that had been biopsied with regard of the diagnosis of Sjögren’s syndrome and previously routinely examined by pathologists. The biopsy is performed as one of most important methods of diagnosing Sjögren’s syndrome. Criteria for the evaluation of this material which included so called focus score have been developed by the American European Consensus Group in 2002 and are still in use throughout the world. Focus score ( FS) is defined as the number of loci containing ≥ 50 cells (lymphocytes, plasmocytes) counted in relation to the unit of surface area of the gland in histological slide equaling 4 mm2. The lymphocytes should appear in otherwise histologicaly unchanged mucosal gland. FS ≥ 1 suggests Sjögren’s syndrome. Taking biopsy in such a way as to provide optimal amount of the gland is a critical for the success of the procedure, which is the reliable pathological assessment of the focus score. The area of the salivary mucosal gland in histopathological slide can be regarded as a marker of diagnostic value of the biopsy material. Therefore firstly I intended to measure the precise area of the gland in biopsy specimens by morphometric methods. To reevaluate focus score previously made by pathologist I introduced my own version of focus score, which I called “morphometric focus index” (MFI) defined as the number of loci counting more than 50 lymphocytes devided by the surface of the gland cross section (in mm2). Moreover I counted total number of lymphocytes per unit of area of the histopatological slide of examined glands. The materials was the consecutive series (79) of lip mucosal biopsies of patients suspected of Sjögren’s syndrome performed in University Stomatological Clinic and examined histopathologicaly in the Chair of Pathomorphology Medical College of Jagiellonian University. The main result and conclusions recived were as follows:1. The weak positive correlation between focus score and its analogue adopted in my work which I called “morphometric focus index” has been found.2. Provided that both focus score and defined by me MFI, can be regarded as markers of intensity of the pathological process in Sjögren’s syndrome, and trying to relate this intensity to the age of patients, my investigation showed that in case of focus score no such correlation has been found and in contrary to this such correlation (to the age) exists in case of MFI. It may suggest that MFI in different way (maybe better) appraises intensity of the disease than focus score does. 3. A weak positive correlation focus score and the total limfocytic density in the biopsy of lip salivary glands has been found.4. Presently applied diagnostic method in Sjögren disease based on histopathological examination of lip salivary gland biopsy, requires further attempts leading to reduction and possibly elimination of too small unrepresentative samples. It has been suggested that lip biopsy assisted with USG could bring a solution in this regard.