Determine the suppressor CD8+ cells phenotype in in vivo adoptive transfer of contact hypersensitivity in mice

Zjawisko supresji reakcji nadwrażliwości kontaktowej w wyniku dożylnego podania haptenu wciąż stanowi obiekt badań. Wiadomo, że odpowiadający za nie czynnik supresyjny produkowany i wydzielany jest przez populację komórek supresyjnych CD8 pozytywnych. Marker CD8 jest typowym dla populacji limfocytów T i części populacji komórek dendrytycznych.Celem pracy było ustalenie fenotypu komórek supresyjnych a przez to potwierdzenie lub wykluczenie ich przynależności do populacji limfocytów. Metodycznie dokonano negatywnej selekcji izolowanych od dawców komórek supresyjnych względem markera CD3 charakteryzującego populacje limfocytów T a nieobecnego na komórkach dendrytycznych. Izolowane komórki jak i ich rozpuszczalne produkty w nadsączach hodowlanych testowano w adoptywnym transferze komórek efektorowych nadwrażliwości kontaktowej, której natężenie mierzono testem usznym 24 godziny po transferze i ponownej prowokacji haptenem.Analiza otrzymanych wyników wykazała, że statystycznie znamienną supresję reakcji nadwrażliwości kontaktowej obserwuje się jedynie w obecności komórek CD3+ lub produktów ich hodowli.Uzyskane wyniki badań dowodzą, że indukowane komórki supresyjne wykazują ekspresję cząsteczki CD3, zatem należą do populacji limfocytów T. Wcześniejsze wyniki badań wskazują, że jest to subpopulacja limfocytów T CD8+ supresyjnych.

Mechanism of suppression of contact hypersensitivity reaction due to intravenous injection of hapten still remains unclear. It is known that this mechanism is mediated by suppressor factor produced and released by CD8+ suppressor cells. Presence of CD8 marker is characteristic for T lymphocyte population as well as for subpopulation of dendritic cells. Present thesis was aimed to determine the suppressor cell phenotype leading to possible classification of these cells as T lymphocytes. Donor suppressor cells were negatively selected by expression of CD3 marker which presence distinguishes T lymphocytes from dendritic cells. Activity of selected cells and their soluble factors was tested in adoptive transfer of effector cells of contact hypersensitivity evaluated as ear swelling response 24 hours after transfer and challenge.Analysis of obtained results showed that statistically significant suppression of contact hypersensitivity was mediated only by CD3+ cells and their soluble products.Present data defined that suppressor cells express CD3 molecule and therefore could be indicated as T lymphocytes. This proved previous statement that suppressor factor is produced by T CD8+ lymphocytes.