Determination of the biophysical parameters of fish keratocytes migration

Celem pracy było określenie podstawowych parametrów biofizycznych migracji rybich keratynocytów na podłożu szklanym w standardowej pożywce (DMEM z dodatkiem 10% surowicy wołowej, oraz penicyliny i streptomycyny), lub buforze fosforanowym (PBS). Komórki te pozyskano z łusek ryby akwariowej – molinezji. W pracy doświadczalnej wykorzystano mikroskop świetlny Zeiss Axio Observer Z1, oraz oprogramowanie Axio Vision, które umożliwiły rejestrowanie migracji komórek metodą fotografii poklatkowej.Podstawowe parametry migracji takie jak chwilowe prędkości komórek i względne zmiany kątowe między następującymi po sobie odcinkami trasy (w skrócie „odchylenia kątowe trasy”) wyznaczono z analizy otrzymanych obrazów. Rozkład wartości otrzymanych parametrów przedstawiono w formie histogramów do których dopasowano funkcję Gaussa.Wykazano że zmiana środowiska pomiarowego ze standardowej pożywki na bufor fosforanowy zwiększa średnią prędkość komórek, lecz nie wywiera wyraźnego wpływu na rozkłady odchyleń kątowych trasy.

The goal of this work was to determine the basic biophysical parameters of fish keratocytes migration on glass substrate in a standard cell medium – DMEM with 10% FBS (Fetal Bovine Serum), penicilin and streptomycin, or in PBS (Phosphate Buffer Saline). Cells were obtained from the scales of an aquarium molly fish. Light microscope Zeiss Axio Observer Z1 and Axio Vision software were used during the experiment. Cell migration was recorded by timelapse method.Values of migration parameters, such as velocity and angular directional deviation were determined by the image analysis. The distribution of obtain parameters values were shown on the histograms, to which the gaussian distribution had been fitted.It was determine, that the change of the standard medium to PBS increased average cell velocity, but did not affect the angular directional deviation.