CMV latency - difficulties in detection in hematopoietic stem cells donors

Ludzki wirus cytomegalii (HCMV) występuje powszechnie w populacji, nie wywołując zazwyczaj poważnych objawów. Posiada on zdolność do przechodzenia w stan latencji (uśpienia). Jest wtedy obecny w obrębie komórek gospodarza, ale nie zachodzi produkcja wirionów wirusowych. Głównym miejscem latencji są hematopoetyczne komórki progenitorowe CD34+. Wraz z tymi komórkami może dostać się do organizmu biorcy szpiku kostnego, gdzie może dojść do reaktywacji wirusa i w konsekwencji doprowadzić do wystąpienia szeregu groźnych objawów. Możliwa jest również sytuacja, w której wirus, obecny już wcześniej w komórkach biorcy, po transplantacji ulega reaktywacji pod wpływem immunosupresji, jakiej poddawani są biorcy przeszczepów. Dlatego ważne jest opracowanie skutecznej metody wykrywania latentnej formy HCMV. W niniejszej pracy podjęto próbę detekcji jego DNA metodą nested PCR oraz PCR w czasie rzeczywistym, jak również detekcji specyficznych dla latencji mRNA. Napotkano jednak przy tym sporo trudności.

Human cytomegalovirus (HCMV) is common in the population, usually without causing severe symptoms. It has the ability to establish latency. Virus is then present within the host cells, but without production of virions. The main sites of latency are hematopoietic progenitor cells - CD34+. Along with these cells HCMV may enter the organism of a bone marrow recipient, where it can reactivate virus and consequently lead to a number of serious symptoms. It is also possible the situation where a virus, already present in the cells in the recipient, is reactivated after transplantation under the influence of immunosuppression, which transplant recipients undergo. So it is important to develop effective methods of detection HCMV latency. In this study I was trying to detect latent HCMV genome by nested PCR and Real Time PCR, as well as detection of latency-specific mRNA. But I encountered many difficulties.