Phytochemical analysis of the aerial parts of Lysimachia ciliata

Niniejsza praca miała na celu przeprowadzenie analizy fitochemicznej części nadziemnych tojeści orzęsionej Lysimachia ciliata, z podziałem na poszczególne organy (liście, łodygi, owoce) w kontekście obecności grup związków typowych dla rodzaju Lysimachia, tj. triterpenoidów, w tym saponin, polifenoli (fenolokwasów oraz flawonoidów) oraz benzochinonów. Analiza fitochemiczna obejmowała badania jakościowo-ilościowe oraz izolację. W pierwszym etapie, w oparciu o jakościową analizę metodą wysokosprawnej chromatografii cieczowej (HPLC) jako optymalną metodę ekstrakcji surowców do dalszych badań ilościowych wytypowano ekstrakcję wspomaganą ultradźwiękami (UAE) z użyciem 70% etanolu. Z kolei, wstępne badania jakościowe metodą chromatografii cienkowarstwowej (TLC) pozwoliły na wytypowanie łodyg jako surowca do dalszej izolacji saponin. W badanych próbkach potwierdzono obecność wszystkich analizowanych grup metabolitów charakterystycznych dla rodzaju Lysimachia, za wyjątkiem benzochinonów. Po raz pierwszy wykazano w tojeści orzęsionej obecność kwasu synapinowego. Najwyższą zawartość polifenoli (kwasu chlorogenowego, kwasu synapinowego i kwercetyny) stwierdzono w liściach. Proces izolacji saponin triterpenowych oparto na technikach chromatografii kolumnowej, oraz cienkowarstwowej chromatografii preparatywnej. Wyodrębniono trzy chromatograficznie jednorodne frakcje, które oznaczono symbolami LCS1, LCS2 i LCS3 (TLC - faza stacjonarna: żel krzemionkowy, faza ruchoma: chloroform-metanol-woda w stosunkach objętościowych 23:12:2). W oparciu o analizę HPLC z detektorem ELSD stwierdzono w nich obecność desglukoanagallozydu B. Frakcje te wymagają jednak dalszego oczyszczenia.

The aim of this study was to perform a phytochemical analysis of the aerial parts of Lysimachia ciliata, with a focus on individual organs (leaves, stems, and fruits), in the context of the presence of compound groups typical for the genus Lysimachia, namely triterpenoids (including saponins), polyphenols (phenolic acids and flavonoids), and benzoquinones. The phytochemical analysis included both qualitative and quantitative studies, as well as compound isolation. In the first stage, based on qualitative analysis using high-performance liquid chromatography (HPLC), ultrasound-assisted extraction (UAE) with 70% ethanol was selected as the optimal method for extracting plant material for further quantitative analysis. Preliminary qualitative studies using thin-layer chromatography (TLC) indicated that the stems were the most suitable plant material for further isolation of saponins. All analyzed groups of metabolites characteristic of the genus Lysimachia were confirmed in the tested samples, with the exception of benzoquinones. For the first time, the presence of synapic acid was demonstrated in Lysimachia ciliata. The highest content of polyphenols (chlorogenic acid, synapic acid, and quercetin) was found in the leaves. The isolation of triterpenoid saponins was based on column chromatography techniques and preparative thin-layer chromatography. Three chromatographically homogeneous fractions were obtained and labeled LCS1, LCS2, and LCS3 (TLC - stationary phase: silica gel; mobile phase: chloroform-methanol-water in a volume ratio of 23:12:2). Based on HPLC analysis with an ELSD detector, the presence of desglucoanagalloside B was confirmed in these fractions. However, further purification is still required.