Assessment of the gonadotoxic effect of 3-methylmethcathinone in the culture of mouse spermatocytes.

3-metylometokatynon (3-MMC) to substytut mefedronu cieszący się popularnością wśród sympatyków nielegalnego rynku narkotykowego. W świetle istniejących w literaturze doniesień, 3-MMC uszkadza wątrobę, a także toksycznie oddziałuje na układ nerwowy i sercowo-naczyniowy. W niniejszej pracy postanowiono pochylić się nad nie podjętym do tej pory tematem dotyczącym wpływu 3-MMC na męskie zdolności reprodukcyjne.Do badań wykorzystano mysie spermatocyty linii GC-2spd, które poddano 24- i 72-godzinnej ekspozycji na sześć wybranych stężeń 3-MMC oraz jego mieszaniny z około czterokrotnie wyższą zawartością 4-MEC (4-metyloetkatynon). Aktywność cytotoksyczną badanych związków oceniono za pomocą dwóch metod in vitro.Test redukcji MTT nie wykazał istotnych statystycznie zmian w żywotności spermatocytów poddanych narażeniu na 3-MMC. Zauważalny jest jednak, towarzyszący obu czasom ekspozycji, trend malejącej żywotności komórek wraz z rosnącym stężeniem związku. Podobny trend charakteryzuje wyniki testu MTT uzyskane dla mieszaniny 3-MMC z 4-MEC, przy czym 72-godzinna inkubacja spermatocytów z mieszaniną o najwyższym badanym stężeniu (300 µM), wywołuje istotne statystycznie obniżenie liczby metabolicznie aktywnych komórek. Test LDH nie wykazał istotnych zmian w aktywności dehydrogenazy mleczanowej w pożywce hodowlanej, zarówno po narażeniu komórek na 3-MMC, jak i na jego mieszaninę z 4-MEC. Widoczna jest niewielka tendencja wzrostowa, która jest nieco wyraźniejsza w przypadku mieszaniny katynonów.Nasze badanie dowodzi, iż kombinacja 3-MMC z 4-MEC może osłabiać męskie zdolności reprodukcyjne poprzez negatywny wpływ na żywotność męskich komórek rozrodczych. Podkreśla ponadto istotę ryzyka, na jakie narażają się użytkownicy nielegalnych substancji, decydując się na stosowanie towaru pozyskanego z niewiarygodnego źródła.

3-methylmethcathinone (3-MMC) is a mephedrone substitute popular among illegal drug market followers. According to scientific reports, 3-MMC damages the liver and has a toxic effect on the nervous and cardiovascular systems. It was decided to concentrate on a previously unexplored topic regarding the impact of 3-MMC on male reproductive capacity.The GC-2spd mouse spermatocytes were subjected to 24- and 72-hour exposure to selected concentrations of 3-MMC and its mixture with 4-MEC. The cytotoxic activity was assessed using two in vitro methods.The MTT reduction test showed no significant changes in the viability of spermatocytes exposed to 3-MMC. However, there is a noticeable trend of decreasing cell viability, accompanying both exposure times, as the concentration of the compound increases. A similar trend characterizes the MTT test results obtained for 3-MMC and 4-MEC mixture, whereby a 72-hour incubation of spermatocytes with the mixture at the highest concentration tested causes a statistically significant reduction in the cell viability. The LDH test showed no significant changes in lactate dehydrogenase activity in the culture medium, both after exposure of cells to 3-MMC and its mixture with 4-MEC. There is a slight upward trend, which is a bit more pronounced in the case of the cathinone mixture.Our study proves that the combination of 3-MMC with 4-MEC may impair male reproductive capacity by negatively affecting the viability of male reproductive cells. It also emphasizes the essence of the risk taken by users of illegal substances when they decide to use goods obtained from an unreliable source.