The role of Neogenin-1/Netrin-1 axis in the regulation of hematopoietic stem cell differentiation

Hematopoetyczne komórki macierzyste (hematopoietic stem cells, HSCs) posiadają zdolność do tworzenia wszystkich typów komórek krwi. Dzięki swojej zdolności do samoodnowy, pula HSCs nie ulega wyczerpaniu wraz ze starzeniem się organizmu. Natomiast, wraz z wiekiem różnicowanie HSCs, jak i ich samoodnowa ulegają zmianom. Mechanizm tych zmian nie jest w pełni poznany, lecz postuluje się, że wpływ mają zarówno czynniki wewnątrz- jak i zewnątrzkomórkowe. Celem pracy jest określenie roli osi Neogenina-1 (Neogenin-1, Neo-1)/Netryna-1 (Netrin-1, Ntn-1) w procesie różnicowania HSCs w zależności od wieku. Pojedyncze komórki HSCs różniące się ekspresją Neo-1 wyizolowano z młodych i starych myszy przy pomocy sortera komórkowego na dołki płytki 96-dołkowej i poddano różnicowaniu. Dodatkowo podczas hodowli połowę z nich stymulowano Ntn-1. Po 3 tygodniach komórki poddano analizie cytometrycznej, która wykazała, że wśród wszystkich grup występuje duża klonalna zmienność w obrębie komórek niedojrzałych (c-kit+), a także większe występowanie komórek progenitorowych u myszy starych wykazujących ekspresję Neo-1. Dodatkowo zaobserwowano, że kolonie komórek od myszy starych są mniejsze, lecz to w grupie myszy starych z ekspresją Neo-1 obecnych jest najwięcej kolonii HSCs.

Hematopoietic stem cells (HSCs) are capable of forming all types of blood cells. Thanks to their ability to self-renew, the pool of HSCs is sustained during aging. However, with age, both the differentiation and the self-renewal of HSCs is altered. The mechanism of these changes is not fully understood, but it is suggested that both intrinsic and extrinsic factors play a role. The aim of this study is to investigate the role Neogenin-1 (Neo-1)/Netrin-1 (Ntn-1) axis in differentiation of HSCs during aging. Single HSCs from young and old mice4were sorted per well and undergo in vitro differentiation. After 3 weeks, the cells were analyzed using flow cytometry, which showed a high clonal variability within immature cells (c-kit+) across all groups, as well as a higher occurrence of progenitor cells in old mice expressing Neo-1. Additionally, it was observed that colonies from old mice are smaller, but the group of old mice with Neo-1 expression has the highest number of HSC colonies.