Optimization of the culture condition of the IPEC-J2 cells line inducing morphological and functional differentiation

Linia komórkowa IPEC-J2 to komórki pochodzące z fizjologicznej tkanki świńskiego nabłonka jelita czczego. Poprzez optymalizację warunków hodowli tej linii komórkowej starano się otrzymać model in vitro tkanki nabłonkowej jelita, który byłby podobny morfologicznie i funkcjonalnie do tkanki, a więc umożliwiał badanie mechanizmów infekcji wirusowych w warunkach laboratoryjnych. Stopień zróżnicowania komórek badano poprzez barwienie immunofluorescencyjne preparatów komórkowych przeciwciałami skierowanymi na wilinę – białko wchodzące w skład cytoszkieletu mikrokosmków. Wykazano, że poprzez modyfikacje pożywki hodowlanej oraz prowadzenie hodowli na półprzepuszczalnej membranie pozwalającej komórkom na pobieranie składników odżywczych zarówno od strony apikalnej, jak i bazalnej uzyskano hodowle o znacząco wyższym poziomie ekspresji wiliny.

IPEC-J2 cell line originate from cells of swine epithelial tissue of the jejunum. By optimizing culture conditions of IPEC-J2 cell line it was sought to develop in vitro model of the epithelial intestinal tissue, which would be morphologically and functionally similar to the tissue in order to make it possible to study mechanisms of viral infections in the laboratory conditions. The differentiation of cells was examined by immunofluorescent staining of cells preparations with antibodies directed to villin – a protein included in the microvilli cytoskeleton. By the modification of culture medium and culturing cells on the semipermeable membrane, which let cells to gather nutrients from apical and basolateral surface – the culture with significantly higher level of villin expression was obtained. The modification of culture medium and culturing cells on the semipermeable membrane lets cells to gather nutrients from apical and basolateral surface – which as a result brings to significantly higher level of villin expression in the culture.