Evaluation of proteolytic, hemolytic and species identification of strains of Staphylococcus by PCR-RFLP gap gene

Bakterie z rodzaju Staphylococcus powszechnie bytują w środowisku naturalnym. Jeden z przedstawicieli tego rodzaju, S. aureus stanowi prawidłową mikroflorę bakteryjną człowieka. Gdy organizm ludzki posiada zaburzoną homeostazę lub doznał urazu wewnętrznego, może dojść do kolonizacji tego szczepu w narządach, co powoduję poważne zakażenia. Jako patogen oportunistyczny może bytować we krwi (Posocznica), ale także w płynie mózgowo-rdzeniowym. Dzięki prostym testom biochemicznym takich jak proteoliza czy hemoliza, można wykazać czy szczepy wydzielają proteazy, które hydrolizują wiązania peptydowe, oraz hemolizyny powodujące lizę erytrocytów. Genetyczna analiza PCR-RFLP genu gap, umożliwia identyfikację gatunkową mikroorganizmów z rodzaju Staphylococcus. Gen gap w we fragmencie o wielkości 933 pz odznacza się zmiennością wśród szczepów gronkowców. Dzięki tej metodzie można sklasyfikować i zidentyfikować bakterie do gatunku lub podgatunku. Celem tej pracy było wykazanie właściwości proteolitycznych i hemolitycznych oraz z wykorzystaniem techniki PCR-RFLP, zidentyfikowanie gatunkowe szczepów z rodzaju Staphylococcus na podstawie genu gap.

Bacteria of the genus Staphylococcus commonly occur in the environment. One of the representatives of this kind, S. aureus is a normal bacterial microflora of people. When human body has an abnormal homeostasis or an internal injury, colonization of the organ can occur, which is already a serious infection. As an opportunistic pathogen may be present in the blood (Sepsis) and also in the cerebrospinal fluid. By simple biochemical tests such as proteolysis or hemolysis, it is possible to show whether strains secrete proteases that hydrolyse peptide bonds and hemolysins that cause lysis of erythrocytes. Genetic PCR-RFLP analysis of the gap gene enables the species identification of Staphylococcus microorganisms. Gene gap in a 933 bp fragment is characterized by variability among strains of staphylococci. Thanks to this method it’s possible to classificate and identificate bacteria to their species or subspecies. The purpose of this work was to demonstrate the proteolytic and haemolytic properties and the use of PCR-RFLP technique, to identify the species of Staphylococcus strains based on the gap gene.