The influence of obatoclax on the differentiation of acute myeloid leukemia ML-1 cells

Obatoklaks to niepeptydowy, syntetyczny związek chemiczny, należący do mimetyków domeny BH3. Celem pracy było określenie wpływu obatoklaksu na różnicowanie komórek ostrej białaczki szpikowej.Doświadczenia przeprowadzono w warunkach in vitro na komórkach ludzkiej ostrej białaczki mieloblastycznej ML-1. Komórki białaczkowe eksponowano na działanie obatoklaksu w stężeniu 50 nM, 100 nM i 250 nM. Efekty działania obatoklaksu na komórki białaczkowe analizowano 24 i 48 godz. po zastosowaniu testowanego związku. Liczebność oraz objętość komórek ML-1 określono przy zastosowaniu metody Coulter’a. Analizę przebiegu cyklu komórkowego oraz analizę ekspresji antygenu CD14 dokonano za pomocą metod cytometrycznych. Ocenę morfologiczną komórek ostrej białaczki szpikowej przeprowadzono w mikroskopie świetlnym, określając procentowy udział komórek zróżnicowanych. Obatoklaks spowodował spadek liczebności i objętości komórek ML-1, zaburzenia w przebiegu cyklu komórkowego oraz wzrost odsetka komórek zróżnicowanych, co potwierdziła analiza ekspresji antygenu CD14. Efekty działania mimetyku domeny BH3 były zależne od zastosowanego stężenia. Poznanie wpływu obatoklaksu na różnicowanie komórek ostrej białaczki szpikowej jest bardzo istotne w poszukiwaniu nowych strategii terapeutycznych.

The obatoclax is a non-peptide synthetic compound, which belongs to BH3 mimetics. The aim of the study was to determine the influence of obatoclax on the induction of differentiation of acute myeloid leukemia cells. The investigations were carried out in vitro on human acute myeloblastic ML-1 cells. The leukemia cells were exposed to the action of obatoclax in the concentration of 50 nM, 100 nM and 250 nM. The effects of BH3 mimetic on the leukemia cells were analyzed 24 h and 48 h after its application. The count and volume of ML-1 cells were analyzed using Coulter method. The analysis of cell cycle progression and the expression of CD14 antigen were performed by flow cytometry techniques. The morphological changes of acute myeloid leukemia cells were determined using light microscopy. After treatment of leukemia cells with obatoclax, a decrease in the size and volume of ML-1 cells, changes in the cell cycle progression, as well as an increase in the number of differentiated cells, were observed. The effects of obatoclax on Ml-1 cells were depended on the concentration. Understanding the impact of obatoclax on the differentiation of acute myeloid leukemia cells is very important in the search for new therapeutic strategies