Comparative analysis of three generations of MDM2 protein antagonists (cis-imidazoline i pyrrolidine derivatives) for activation of p53 protein

Jednym z głównych białek odpowiedzialnych za kontrolę karcynogenezy w komórkach organizmu człowieka jest białko p53. W odpowiedzi na bodźce stresowe inicjuje ono rozpoczęcie procesów prowadzących ostatecznie do degradacji komórki. Przez swą niebywale istotną rolę w utrzymaniu homeostazy, konieczne jest precyzyjne kontrolowanie jego aktywności, by uniknąć niepotrzebnej aktywacji białka p53. W regulację tą zaangażowane jest wiele białek, wśród których najważniejszymi są białka MDM2 i MDMX. Nadekspresja tych białek jest przyczyną zmniejszenia aktywności białka p53 co prowadzi do nieprawidłowej odpowiedzi na stres, a w konsekwencji – nowotworzenia. Z tego powodu poszukiwane są cząsteczki zdolne do hamowania aktywności białka MDM2 w celu opracowania skutecznej terapii przeciwnowotworowej. Niniejsza praca dotyczy porównania aktywności trzech generacji antagonistów białka MDM2. Komórki linii U-2 OS stymulowano trzema związkami będącymi znanymi inhibitorami białka MDM2, a następnie wyizolowano białka z komórek i stosując metodę Western Blot zmierzono poziom ekspresji białka p53. Jako próby kontrolnej użyto białka wyizolowanego z komórek tej samej linii komórkowej stymulowanej DMSO.

One of the main proteins responsible for controlling carcinogenesis in the cells of human body is the p53 protein. In response of stress stimuli, it initiates the initiation of processes that ultimately lead to cell degradation. Because of its extremely important role in maintaining homeostasis, it is necessary to precisely control its activity to avoid unnecessary activation of the p53 protein. Many proteins are involved in this regulation, among which the most important are MDM2 and MDMX proteins. Overexpression of these proteins is the cause of the permanent blockade of p53 activity which leads to an abnormal response to stress and, as a consequence, leads to tumorigenesis. For this reason, molecules capable of inhibiting the activity of MDM2 protein are sought for the purpose of developing effective anti-cancer therapy. This work concerns the comparison of the activity of three generations of MDM2 protein antagonists. U-2 OS cell lines were stimulated with three compounds known to inhibit MDM2 protein, and then proteins were isolated from cells and the level of p53 protein expression was measured using the Western Blot. As a control, the protein isolated from cells of the same DMSO-stimulated cell line was used.