The release of chlorophyllide from the complexes Chlide:POR:NADPH in the presence of selected factors.

Redukcja protochlorofilidu (Pchlid) do chlorofilidu (Chlid) jest jedną z najważniejszych reakcji, która umożliwia powstanie chlorofilu. W roślinach okrytonasiennych reakcja ta zachodzi pod wpływem światła i katalizowana jest przez zależną od światła oksydoreduktazę protochlorofilid:NADPH (LPOR). Siewki okrytonasiennych nie mające dostępu do światła różnią się wyglądem od siewek rosnących w warunkach świetlnych, a biosynteza chlorofilu zachodzi tylko do etapu utworzenia Pchlidu. Celem pracy było zbadanie wpływu wybranych czynników (tj. KCl, NaCl, MgCl2, CaCl2, pH buforu, aldehyd glutarowy, poli-L-lizyna) na uwalnianie Chlidu z kompleksów z enzymem oraz ich wpływ na przesunięcia spektralne obserwowane po zadziałaniu światłem na zawiesinę PLB. Poprzez analizę niskotemperaturowych widm fluorescencji zaobserwowano, że badane sole metali jednowartościowych i dwuwartościowych (w najwyższych badanych stężeniach), pH buforu (tj. pH=5.4) oraz poli-L-lizyna wpływają na spadek fotoredukcji oraz szybsze uwalnianie Chlidu z kompleksów z enzymem. Użyty w doświadczeniach aldehyd glutarowy okazał się mieć bardziej stablilizujący wpływ na PLB w temp. 5˚C niż w temp. pokojowej.

The reduction of protochlorophyllide (Pchlide) to chlorophyllide (Chlide) is one of the most important reactions that makes the formation of chlorophyll possible. In the case of angiospermous plants this reaction takes place under the influence of light and it is catalysed by an enzyme that is light-dependent – NADPH:protochlorophyllide oxidoreductase (LPOR). The seedlings of angiospermous plants that did not have the access to light differ from those under light conditions appearance-wise and the chlorophyll biosynthesis only takes place to the stage of Pchlide formation. The objective of the presented work was to present the influence of selected factors (i.e. KCl, NaCl, MgCl2, CaCl2, buffer pH, glutaraldehyde, poly-L-lysine) on the release of Chlide from the complexes with enzyme and their influence on spectral shifts observed after using light on PLB suspension. Through the analysis of low-temperature fluorescent spectra it was observed that that the tested univalent and divalent salts (in the highest tested concentrations), buffer pH (i.e. pH=5.4) and poly-L-lisine influence the decrease of photoreduction and faster release of Chlide from the complexes with enzyme. Glutaraldehyde used in the experiments turned out to have a more stabilizing effect on PLB at 5˚C than at room temperature.