Comparison of the biological activity of the piperidinone derivative (AMG232) with the activity of other MDM2 protein antagonists

Białko p53 jest zaangażowane w takie procesy komórkowe jak indukcja apoptozy, regulacja cyklu komórkowego oraz aktywacja mechanizmów naprawy DNA. W związku z tymi właściwościami można go określić mianem supresora nowotworzenia. Inaktywacja białka p53 może nastąpić na skutek mutacji punktowych i delecji w obrębie kodującego je genu, bądź za sprawą nadmiernej degradacji proteosomalnej, związanej z działaniem jego głównego regulatora komórkowego – białka MDM2. Nieobecność aktywnego białka p53 przyczynia się do rozwoju nowotworu. Potencjalne działanie przeciwnowotworowe antagonisty białka MDM2, związku AMG232, polega na tym, że wiąże się on z białkiem MDM2 zapobiegając tym samym interakcji MDM2-p53. Przywrócona w ten sposób aktywność p53 prowadzi do apoptozy komórek nowotworowych. Ma to istotne znaczenie przy opracowywaniu terapii zwalczającej rozwój nowotworu. Celem niniejszej pracy było porównanie aktywności biologicznej związku AMG232, będącego pochodną piperydynonu, z innymi antagonistami białka MDM2. Do porównania wzięto następujące związki: Nutlin-3, RG7112 oraz RG7388. Przedstawiona praca zawiera opis badań in vivo przeprowadzonych na linii komórkowej nowotworu kostniakomięsaka U-2 OS oraz ocenę aktywności wymienionych związków poprzez detekcję białka p21, kodowanego przez gen będący pod kontrolą transkrypcyjną białka p53, przeprowadzoną za pomocą hybrydyzacji western blot.

The p53 protein is involved in such cellular processes as the induction of apoptosis, regulation of the cell cycle and activation of DNA repair mechanisms. Due to these properties, it can be described as a tumor suppressor. Inactivation of the p53 protein may occur as a result of point mutations and deletions within the gene encoding them, or due to excessive proteosomal degradation, associated with the action of its main cellular regulator - MDM2 protein. The absence of active p53 protein contributes to the development of cancer. The potential antitumor activity of the MDM2 protein antagonist AMG232 is that it binds to the MDM2 protein thus preventing the interaction of MDM2-p53. The p53 activity restored in this way leads to apoptosis of cancer cells. This is important in the development of anti-cancer therapy. The aim of this study was to compare the biological activity of AMG232, a derivative of piperidinone, with other MDM2 protein antagonists. The following compounds were taken for comparison: Nutlin-3, RG7112 and RG7388. The presented work contains a description of in vivo studies carried out on the U-2 OS osteosarcoma tumor cell line and assessment of the activity of said compounds by detecting the p21 protein, encoded by the gene under transcriptional control of the p53 protein, carried out by western blot hybridization.