Development and validation of a method for the determination of lomefloxacin and its photodegradation products.

Lomefloksacyna należy do II grupy fluorochinolonów i jest antybiotykiem bakteriobójczym o szerokim spektrum działania wobec bakterii Gram-dodatnich i Gram-ujemnych. Ze względu na posiadanie atomu fluorowca w pozycji -8, lomefloksacyna cechuje się też silną fototoksycznością. Celem pracy było opracowanie i walidacja metody wysokosprawnej chromatografii cieczowej z detekcją spektrofotometryczną w zakresie UV do oznaczania lomefloksacyny obok produktów fotodegradacji. W badaniach wykorzystano chromatograf cieczowy Elite LaChrom firmy HITACHI, kolumnę Kinetex 5u XB- C18 100A, o wymiarach 250x4,60mm i rozmiarze ziaren 5µm (typ core-shell); Phenomenex oraz mieszaninę buforu fosforanowego (25mM, pH=3,20) i acetonitrylu w stosunku 87 : 13 (v/v) jako fazę ruchomą. Szybkość przepływu wynosiła 1,0 ml/minutę, a czas analizy 25 minut. Detekcję UV prowadzono przy długości fali 280 nm.Wykonana walidacja wykazała, że metoda jest specyficzna i cechuje się dobrą czułością. Ustalono, że granica wykrywalności lomefloksacyny wynosi 0,0040 mg/ml, a granica oznaczalności 0,0121 mg/ml. Dowiedziono, iż metodę cechuje liniowość w zakresie stężeń 0,1317 – 0,2195 mg/ml, dobra dokładność reprezentowana przez średni poziom odzysku wynoszący 100,66%, oraz precyzja, którą określa wartość RSD wynosząca 1,17%, a także precyzja pośrednia z wartością RSD wynoszącą 1,30%.Na podstawie otrzymanych wyników walidacji stwierdzono, że opracowana metoda spełnia kryteria akceptacji i może być stosowana do analizy ilościowej lomefloksacyny obok produktów fotodegradacji.

Lomefloxacin belongs to the second generation of fluoroquinolones and is an antibacterial drug with a broad-spectrum of activity against Gram-positive and Gram-negative bacteria. In view of having a halogen atom at position -8, lomefloxacin is reported to have strong phototoxicity.HPLC-DAD method was developed for determination of lomefloxacin in presence of its photodegradation products. Chromatography was performed on a Kinetex 5u XB- C18 100A, 250x4,60mm i.d., 5 µm particle size column (core-shell type) with 0.025 M phosphate buffer (pH=3.20) : acetonitrile (87: 13 v/v) as mobile phase at a flow rate of 1.0 mL min-1. PDA detection was performed at 280 nm.The elaborated method meets the acceptance criteria for specificity. The linear regression analysis for the calibration curve showed a good linear correlation over the concentration range 0,1317 – 0,2195 mg mL-1. The limits of detection and quantification were respectively 0.0040 and 0.0121 mg mL-1. The method was shown to be precise at intra-day and inter-day levels, as reflected by the relative standard deviation values, lower than 1.17% and 1.30% respectively, and characterized by a recovery rate of 100.66%.On the basis of the validation results it was found, that the developed method meets the acceptance criteria and can be used for quantitative analysis of lomefloxacin in presence its photodegradation products.