The effect of JK39 fullerene on cell viability of B16F10 melanoma cells in 3D culture

Celem tej pracy licencjackiej było ustalenie, czy fuleren JK39 posiada odpowiednio wysoką reaktywność fotochemiczną i aktywność fotodynamiczną, aby mógł zostać zastosowany jako fotosensybilizator do terapii fotodynamicznej przy leczeniu czerniaka. Do eksperymentów wykorzystano ustabilizowaną linię czerniaka mysiego – B16F10. Aktywność fotodynamiczną fulerenu JK39 badano w układzie in vitro zarówno w hodowli 2D, jak i 3D, gdzie komórki hodowane były w postaci sferoid. Przeżywalność komórek w hodowli 2D, po naświetlaniu światłem zielonym (λ = 520 nm, 18 mW/cm2) w obecności fulerenu JK39, badano stosując test MTT. W przypadku hodowli 3D ocenę żywotności sferoid określono na podstawie analizy zdjęć przed i po 24 godzinach od naświetlania. W celu określenia własności fotosensybilizujących fulerenu JK39 wykonano pomiary tlenometrii i pułapkowania spinowego EPR. Wyznaczono szybkość konsumpcji tlenu w obecności histydyny oraz zbadano wpływ melaniny na analizowane procesy.

The aim of this BA thesis was to determine whether the fullerene JK39 has sufficiently high photochemical reactivity and photodynamic activity to be used as a photosensitizer for photodynamic therapy in the treatment of melanoma. The stabilized murine melanoma cell line - B16F10 was used for the experiments. The photodynamic activity of JK39 fullerene was tested in the in vitro system in both 2D and 3D cultures, where the cells were grown in the form of spheroids. The survival of cells in a 2D culture after illumination with green light (λ = 520 nm, 18 mW /cm2) in the presence of JK39 fullerene was investigated using the MTT assay. In the case of 3D cultures, the evaluation of the viability of the spheroids was determined, before and 24 hours after irradiation. In order to determine the photosensitizing properties of JK39 fullerene, EPR spin trapping measurements were performed. The rate of oxygen consumption in the presence of histidine was determined and the influence of melanin on the analyzed processes was examined.