The impact of orotic acid on ATP synthesis by human ovarian granulosa cells

Komórki ziarniste jajnika są najważniejszymi komórkami somatycznymi w pęcherzyku jajnikowym, pełnią kluczową rolę dla rozwoju oocytu i mają wpływ na wiele mechanizmów zachodzących w pęcherzyku jajnikowym oraz oocycie. Chronią oocyt przed uszkodzeniami mechanicznymi oraz dostarczają dla niego niezbędnych substancji odżywczych, czynników wzrostu, prekursorów metabolicznych, a także hormonów (Duncan i wsp., 2018).Komórki ziarniste jajnika stanowią wsparcie energetyczne dla oocytu, dlatego poszukiwanie substancji wspomagających tę rolę jest niezwykle ważne. Doniesienia literaturowe sugerują, że kwas orotowy wpływa pozytywnie na żywotność komórek linii HGrC1 i zwiększa ich aktywność mitochondrialną (Marynowicz i wsp., 2023), a także niesie za sobą szereg pozytywnych cech dla organizmu człowieka. Celem pracy było zdeterminowanie czy kwas orotowy ma wpływ na syntezę ATP w ludzkich komórkach ziarnistych jajnika. W badaniach zastosowano metodę Seahorse, a badane komórki linii HGrC1 podzielone zostały na dwie grupy: kontrolną oraz badawczą, która była traktowana kwasem orotowym w dawce 100 µM przez 24 godziny. Następnie analizowano otrzymane wyniki na podstawie poziomu wskaźnika produkcji ATP w glikolizie oraz w fosforylacji oksydacyjnej. Przeprowadzone badania wykazały, że zastosowanie kwasu orotowego spowodowało wzrost poziomu syntezy ATP na drodze fosforylacji oksydacyjnej w ludzkich komórkach ziarnistych jajnika. Wyniki te sugerują, że kwas orotowy, jako substancji pochodzenia naturalnego, może zostać wykorzystany do poprawy energetyki komórkowej.

Ovarian granulosa cells are the most important somatic cells in the ovarian follicle, playing a key role in oocyte development and influencing many mechanisms occurring in both ovarian follicle and oocyte. They protect the oocyte from mechanical damage and provide it with essential nutrients growth factors, metabolic precursors and hormones (Duncan et al., 2018). Granulosa cells provide energetic support for the oocyte, making the search for substances that support this role extremely important. Literature reports suggest that orotic acid positively affects the viability of HGrC1 cell line and increases its mitochondrial activity (Marynowicz et al., 2023), and also brings several positive benefits to the human body. The aim of this study was to determine whether orotic acid affects ATP synthesis in human ovarian granulosa cells. The study used the Seahorse method as the HGrC1 cells were divided into two groups: a control group and an experimental group which was treated with orotic acid at a dose of 100 µM for 24 hours. The results were then analyzed based on the level of ATP production in glycolysis and oxidative phosphorylation. The conducted studies showed that the use of orotic acid had caused an increase in ATP synthesis through oxidative phosphorylation in human ovarian granulosa cells. These results suggest that orotic acid, as naturally derived, could be used to enhance cellular energy metabolism.