Polylactosaminyl and high-mannose oligosaccharydes glycoproteins from ectosomes line WM266-4 human melanoma

Czerniak jest chorobą nowotworową pochodzącą z melanocytów, które nabyły złośliwycharakter. Przyczyną rozwoju nowotworu skóry mogą być predyspozycje genetycznejak również promieniowanie ultrafioletowe. Najbardziej narażone na nowotwór sąosoby o jasnym fenotypie skóry. Czerniak rozprzestrzenia się w szybkim tempietworząc przerzuty. W metastazie nowotworu uczestniczą ektosomy, czyli pęcherzykibłonowe będące nośnikami cząsteczek białkowych. Posiadają na swojej powierzchnicharakterystyczne glikany, które odgrywają istotną rolę w rozwoju i rozprzestrzenianiuczerniaka. Trwają badania na wykorzystaniem mikropęcherzyków wraz zglikozylowanymi oligosacharydami w diagnostyce.Zadaniem niniejszej pracy było udowodnienie obecności oligosacharydówwielomannozowych oraz polilaktozaminylowych w ektosomach pochodzących zmetastatycznej linii WM266-4 ludzkiego czerniaka skóry. Przeprowadzono rozdziałbiałek wyizolowanych z ektosomów metodą elektroforezy SDS-PAGE, po czymprzeniesiono próbki na błonę PVDF z wykorzystaniem Western Blot. Do identyfikacjiglikoprotein wykorzystano specyficzne lektyny. Otrzymane wyniki informują oobecności glikanów wielomannozowych i polilaktozaminylowych w pęcherzykachbłonowych metastatyczmego czerniaka skóry.

Melanoma is a cancer originating from melanocytes. It has malignant character. Themain cause of developing skin cancer may be ultra-violet radiation, as well as geneticpredisposition. The most vulnerable to cancer are people with light skin phenotype.Melanoma spreads rapidly and in consequence forms metastases. The metastasis ofcancer involves ectosomes. They are membrane vesicles, that work as carriers ofprotein molecules. They have on their surface characteristic glycans, which play animportant role in the development and spread of melanoma. The use of microvesicleswith glycosylated oligosaccharides is being studied for their future diagnostic purposes.The purpose of this study was to prove the presence of high-mannose andpolylactosaminyl oligosaccharides in ectosomes derived from WM266-4 line metastatichuman melanoma. Separation of proteins was carried out by SDS-PAGE, and then thetransformation of the samples to a PVDF membrane using a Western Blot took place.Specific lectins were used in order to identify glycoproteins. The results indicate thepresence of high-mannose and polylactosaminyl glycans in the melanomamicroparticles.