Expression and purification of a recombinant human monoclonal scFv antibody specific to VEGF-C

Nowotwory są jedną z głównych przyczyn zgonów na świecie. Szczególnie trudną kwestią w leczeniu nowotworów jest ich przerzutowanie, które może przebiegać dwiema drogami: krwionośną i limfatyczną. VEGF-C jest białkiem z rodziny czynników wzrostu śródbłonka naczyniowego, którego interakcja z receptorem VEGFR-3 skutkuje zwiększeniem przeżywalności, nasileniem migracji i proliferacji komórek śródbłonka limfatycznego, a procesy te mogą sprzyjać przerzutowaniu nowotworów. Niniejsza praca dotyczy ekspresji i oczyszczania ludzkiego rekombinowanego przeciwciała monoklonalnego formatu scFv specyficznego względem mysiego VEGF-C. Przeciwciało to będzie wykorzystywane do badania procesu patologicznej limfangiogenezy w mysich modelach nowotworowych. Przetestowano także użyteczność tego przeciwciała w technice Western blotting i stwierdzono, że nie jest ono przydatne w tej metodzie.

Cancer is the leading cause of death worldwide. Its metastasis by lymphatic and blood vessels seems to be the major issue in cancer therapy. VEGF-C is a member of vascular endothelial growth factor family. Its interaction with VEGFR-3 receptor results in increased survivability, migration and proliferation of lymphatic endothelial cells; these processes may support metastasis. The goal of this thesis was expression and purification of the recombinant human monoclonal scFv antibody specific to VEGF-C. This antibody will be used for studies on pathological lymphangiogenesis in mouse tumor models. In addition, the usefulness of this antibody in Western blotting was tested and it was shown that it is not applicable in this technique.