Influence of ectosomes released by metastatic tumor cells on less invasive cells motility.

Ektosomy to kuliste pęcherzyki o średnicy 100-1000 nm, należące domikropęcherzyków błonowych. Powstają przez pączkowanie błony komórkowej ipełnią istotną funkcję w komunikacji międzykomórkowej, dzięki ich zdolności doprzenoszenia składników pochodzących z komórki donorowej. Ektosomy pochodzenianowotworowego przyczyniają się do utworzenia korzystnej dla nowotworu niszypoprzez transfer biologicznie czynnych cząsteczek oraz produktów genów. Celemniniejszej pracy było zbadanie czy migracja i żywotność pierwotnych komórekczerniaka WM115 i WM793 może być modulowana przez ich własne ektosomy, a takżeprzez ektosomy uwalniane przez komórki autologicznych linii metastatycznych:WM266-4 i 1205Lu. Do hodowli komórek pierwotnych WM115 i WM793 dodawanoich własne ektosomy, a także ektosomy pochodzące z autologicznej linii metastatycznejw dawkach po 30 i 60 µg. Właściwości migracyjne komórek badano testem gojenia ran,a żywotność i zdolności proliferacyjne testem AlamarBlue. Ektosomy w dawce 30 µguwalniane przez komórki WM115 i WM266-4 spowodowały około 2-krotny wzrostmigracji komórek pierwotnych, natomiast w dawce 60 µg około 1,5-krotny wzrostmigracji, a także nieznaczny wzrost zdolności proliferacyjnych w porównaniu dokomórek hodowanych w warunkach standardowych. Ektosomy w dawce 30 µguwalniane przez komórki WM793 spowodowały około 2-krotny wzrost migracji, a wdawce 60 µg około 6-krotny wzrost. Natomiast ektosomy w dawce 30 µg, uwalnianeprzez komórki metastatyczne 1205Lu wywołały około 4,5-krotny wzrost migracji, a wdawce 60 µg około 7-krotny wzrost, jednak istotny statystycznie efekt zaobserwowanowyłącznie w przypadku większych dawek. Ponadto wykazano nieznaczny wzrostzdolności proliferacyjnych po dodaniu ektosomów uwalnianych przez komórki WM793i prawie 1,5-krotny wzrost po dodaniu ektosomów uwalnianych przez komórki 1205Lu.W obydwu przypadkach potencjał migracyjny komórek nie zależał od stopniainwazyjności komórek, z których pochodziły ektosomy. Badania potwierdziłystymulujący wpływ ektosomów na proces nowotworzenia, szczególnie na migrację izdolności proliferacyjne komórek czerniaka, co jest zgodne z wcześniejszymidoniesieniami.

Ectosomes are spherical vesicles with a diameter 100-1000 nm, that belong toextracellular vesicles. They are released by cell membrane budding and they playessential role in the intercellular comunication, thanks to their ability to transfer cargofrom the donor cell. Tumor-derived ectosomes contribute to form favorable tumor nicheby transporting bioactive molecules and gene products. We investigated if primarymelanoma cells WM115 and WM793 motility and proliferation can be modulated bytheir own ectosomes and by ectosomes released by autologus metastatic cells (WM266-4 and 1205Lu cell lines). To WM115 and WM793 primary cell culture were added theirown ectosomes and ectosomes released by autologus metastatic cells in doses 30 and 60µg. Cell motility was examined by wound healing assay and cell proliferation byAlamarBlue assay. 30 µg dose of ectosmes released by WM115 and WM266-4 cellscaused 2-fold increase of primary cell motility and 60 µg dose caused about 1,5-foldincrease. Also proliferation properties slightly increased compared to standard cellculture. 30 µg dose of ectosomes released by WM793 cells caused 2-fold increase ofown cell motility and 60 µg dose caused about 6-fold increase. 30 µg dose of ectosomesreleased by 1205Lu cells caused about 4,5-fold increase of WM793 cells motility and60 µg dose caused about 7-fold increase, however statistically significant difference wasobserved only in higher dose. Also proliferation abilities increased. WM793 cellsincubated with their own ectosomes increased slightly their proliferation, and whenwere incubated with ectosomes released by 1205Lu cells their proliferation potentialincreased about 1,5-fold. In both cases migratory potential of recipient cells were notdependent on invasive potential of donor cells. Our results confirm enhancing effect ofectosomes on tumor progression, in particular, cell motility and proliferation and arecompatible with previous research.