Determination of synthetic cannabinoids and their metabolites by HPLC-ESI-MS-MS method in biological material for medico - legal opinions

W ramach niniejszej pracy opracowano przesiewową metodę identyfikacji syntetycznych kananbinoidów we krwi z zastosowaniem metody wysokosprawnej chromatografii cieczowej sprzężonej z tandemową spektrometrią mas, z jonizacją przez rozpylanie w polu elektrycznym (HPLC-ESI-MS-MS). Optymalizowano proces ekstrakcji wybranych syntetycznych kannabinoidów za pomocą odbiałczania, ekstrakcji ciecz-ciecz oraz ekstrakcji do fazy stałej (SPE). Odpowiednią metodą izolacji syntetycznych kannabinoidów okazała się SPE.Opracowaną metodę poddano procesowi walidacji dla analitów: AM-2233, AB-FUBINACA, AB-PINACA, PX-1, MDMB-CHMICA, THJ-2201, NM-2201, AKB-48, AB-CHMINACA oraz wzorców wewnętrznych: UR-144-D5, UR-144-COOH-D5 i JWH-081-D11. Metoda była selektywna i specyficzna dla analizowanych związków. Określono takie parametry walidacyjne jak liniowość, LOD, LOQ, dokładność, precyzję, efekt matrycy, odzysk oraz wydajność procesu. Opracowana metoda SPE/HPLC-ESI-MS-MS pozwala na oznaczenie AM-2233, AB-FUBINACA, AB-PINACA, PX-1, MDMB-CHMICA, THJ-2201, NM-2201, AKB-48, AB-CHMINACA w próbkach krwi, a także na analizę przesiewową, identyfikacyjną 26 innych substancji z grupy syntetycznych kannabinoidów. Metoda jest użytecznym narzędziem dla potrzeb opiniowania medyczno – sądowego w przypadkach nadużywania syntetycznych kannabioidów przez kierowców, czy zatruć spowodowanych ich przedawkowaniem.

Aim of this study was to develope a screening method for identification of synthetic cannabinoids in blood using high performance liquid chromatography coupled with electrospray ionization tandem mass spectrometry (HPLC-ESI-MS-MS). The extraction procedure was optimized for selected synthetic cannabinoids by protein precipitation, liquid - liquid extraction and solid phase extraction (SPE). The appropriate method of isolation of synthetic cannabinoids was SPE.The method has been validated for the analytes: AM-2233, AB-FUBINACA, AB-PINACA, PX-1, MDMB-CHMICA, THJ-2201, NM-2201, AKB-48 , AB-CHMINACA and internal standards: UR-144-D5, UR-144-COOH-D5 and JWH-081-D11 and was found to be selective and specific for all tested compounds. The following validation parameters were determined: linearity, LOD, LOQ, accuracy, precision, matrix effects, recovery and process efficiency.Developed SPE/HPLC-ESI-MS-MS method allows to determine AM-2233, AB-FUBINACA, AB-PINACA, PX-1 MDMB-CHMICA, THJ-2201, NM-2201, AKB-48, AB-CHMINACA in blood samples and screening analysis of 26 other substances from the group of synthetic cannabinoids. It is also a useful tool in the evaluation of medico - legal opinion in cases of synthetic cannabinoids abuse amongst drivers or poisoning caused by the overdose.