The comparison of the expression of cell cycle-related genes in normal and tumor ovarian granulosa cells

Rak jajnika stanowi czwartą przyczynę zgonów wśród wszystkich nowotworów złośliwych występujących u kobiet w naszym kraju. Jest on jednym z najgorzej rokujących nowotworów ginekologicznych. Szczególnym przypadkiem jest nowotwór komórek ziarnistych jajnika podtypu młodzieńczego (JGCT, ang. juvenile granulosa cell tumor), pojawiający się często przed okresem dojrzewania. Charakteryzuje się on agresywnością i zróżnicowaną histomorfologią, co czyni kluczowym jego wczesne wykrycie. Niemniej jednak, ze względu na rzadkość występowania, etiologia JGCT jest wciąż słabo poznana. Braki w wiedzy o funkcjonowaniu tego ziarniszczaka objawiają się w ograniczonych metodach jego wykrywania i leczenia. Celem niniejszej pracy było lepsze poznanie i zrozumienie zaburzeń w ekspresji genów regulatorowych cyklu komórkowego pomiędzy komórkami ziarnistymi prawidłowymi a nowotworowymi. Jako modele in vitro posłużyły linie komórkowe HGrC1 (komórki prawidłowe, ziarniste) i COV434 (komórki ziarniszczaka młodzieńczego). Za pomocą metody RT-qPCR sprawdzono ekspresję genów związanych z cyklem komórkowym (CCND1, CCND2, CCND3, CCNE1, CCNA2, CDK2, CDK4 oraz CCKN1A). Otrzymane wyniki pozwoliły na opisanie różnic pomiędzy obiema linami. W komórkach nowotworowych odnotowano istotnie podniesioną ekspresje cyklin D3 i E1, drugiej kinazy cyklino-zależnej oraz p21 – jednego z inhibitorów kinaz cyklino-zależnych; wraz z istotnie obniżoną ekspresją cykliny D1 oraz czwartej kinazy cyklino-zależnej w porównaniu z linią prawidłową. W kwestii cykliny D2 oraz A2 nie odnotowano żadnych istotnie statystycznie różnic. Przedstawione wyniki obrazują aberracje w ekspresji genów związanych z cyklem komórkowym, które mogę odgrywać kluczową rolę w rozwoju JGCT. Co więcej, stanowią wyjście do dalszych badań, mających na celu opracowanie nowych markerów pozwalających na wcześniejsze wykrycie nowotworu, jak i nowych, skuteczniejszych terapii.

The ovarian cancer is the fourth cause of death among all the malignant tumors occurring in women in our country. It is one of the worst prognostic gynecological malignancies. Juvenile granulosa cell tumor (JGCT) is a particular case of tumor which usually occurs before puberty. It is known for its aggressiveness and vide histomorphology which makes its early detection crucial. Nevertheless, due to its rarity, the etiology of JGCT still remains unclear. Lack of understating of its management results in limited methods of detection and treatment. The aim of the present study was to better understand the abnormalities in the expression of cell cycle regulator genes between normal and tumor-driven cells. Two cell lines HGrC1 (normal granulosa cells) and COV434 (juvenile granulosa tumor cells) were used as in vitro models. The RT-qPCR method was used to examine the level of expression of genes related to cell cycle (CCND1, CCND2, CCND3, CCNE1, CCNA2, CDK2, CDK4 and CCKN1A). Obtained results allowed to describe the differences between both cell lines. Higher expression of cyclins D3 and E1 with cyclin-dependent kinase 2 and p21 – one of the cyclin-dependent kinase inhibitors, were observed in tumor-driven cells along with lower expression of cyclin D1 and cyclin-dependent kinase 4, compared to the normal cells. In case of cyclins D2 and A2 none of statistically important differences were noted. Presented results describe aberrations in expression of genes related with cell cycle which can play a crucial role in the development of JGCT. What is more, these results could be a starting point for further research leading to the development of new, valuable markers and more targeted therapies.