Badanie aktywności DExD/H-box RNA helikaz w makrofagach karpia (Cyprinus carpioL.) podczas stymulacji poly(I:C)
alternative title:
The study of the activity of DExD/H-box RNA helicases in common carp (Cyprinus carpio L.) macrophages during poly (I:C) stimulation
author:
Dąbek Wiktoria
reviewer:
Rakus Krzysztof, Hofman Sebastian
advisor:
Rakus Krzysztof
date of submittion
:
2020-07-27
language:
Polish
abstract in Polish:
Kluczowym etapem nieswoistej odpowiedzi immunologicznej jest szybkie rozpoznanie patogenu przez układ odpornościowy gospodarza, a następnie aktywacja syntezy interferonów typu I. Ryby są pierwszymi kręgowcami, które posiadają w pełni wykształcony nabyty i wrodzony układ odpornościowy. W odporności wrodzonej główną rolę w rozpoznawaniu patogenów odgrywają receptory rozpoznające wzorce (PRR). PRR rozpoznają wzorce molekularne związane z patogenami (PAMP). W ostatnich latach opisano nową grupę PRR, do których należą DExD/H-box RNA helikazy nienależące do grupy receptorów RIG-I-podobnych (RLR). Mechanizmy działania tych receptorów nie są do końca poznane, a doniesienia na ich temat dotyczą głównie badań przeprowadzonych na ssaczych liniach komórkowych. Celem niniejszej pracy było określenie ekspresji konstytutywnej wybranych genów kodujących DExD/H-box RNA helikazy nienależących do RLR (DDX1, DDX3, DHX9, DDX21 i DHX36) w 12 wybranych narządach karpia oraz makrofagach wyizolowanych z nerki głowowej. Badano także ekspresję wymienionych RNA helikaz w komórkach układu odpornościowego (makrofagach pobranych z nerki głowowej karpia) stymulowanych poly (I:C) przez 4h i 24h. Wykazano obecność transkryptu wybranych DExD/H-box RNA helikaz we wszystkich badanych narządach i komórkach karpia. W przypadku stymulacji komórek poly (I:C) nie odnotowano istotnie statystycznego wzrostu poziomu ekspresji badanych helikaz.
abstract in English:
The most important stage of innate immune response is the rapid recognition of pathogen in the cells by the host's immune system, and activation of type I interferon synthesis. Fish are the first vertebrates, which have a fully developed acquired and innate immune system. Pattern recognition receptors (PRRs) play a major role in innate immunity. PRRs recognize molecular patterns associated with pathogens (PAMP). In recent years, a new PRR group has been described which includes DExD / H-box RNA helicases not belonging to the RIG-I-like receptor group (RLR). The mechanisms and role in the immune response of these receptors are not fully understood. These receptors have been mainly studied using mammalian cell lines. The aim of this study was to examine the constitutive expression of five non-RLR DExD/H-box RNA helicases (DDX1, DDX3, DHX9, DDX21 and DHX36) in 12 selected organs and head kidney derived macrophages of common carp. Another aim of this study was to examine the expression of genes encoding RNA helicases in macrophages from head kidney, during 4h and 24h stimulation of poly (I:C) - a synthetic analog of dsRNA, which mimicks viral infection. In this study the transcripts of RNA helicases were found in all studied organs and cells. No differences in expression level of studied DExD/H-box RNA helicases were demonstrated in head kidney derived macrophages upon poly (I:C) stimulation.