Optymalizacja badania komórkowego wychwytu znakowanej 2-deoksy-D-glukozy z użyciem scyntylatora w fazie stałej.
alternative title:
Optimization studies of cellular of labeled 2-deoxy-D-glucose using a solid-phase scintillant.
author:
Jędrzejewska Sylwia
reviewer:
Siwek Agata, Nowak Gabriel
advisor:
Nowak Gabriel
date of submittion
:
2014-07-14
language:
Polish
abstract in Polish:
Metody radioizotopowe uważane są za „złoty standard” w badaniach przedklinicznych nad nowymi związkami o potencjalnym działaniu farmakologicznym. Służą one do badania i charakterystyki receptorów i ligandów, śledzenia losów różnych substancji w komórce, a także badania wpływu związków chemicznych na procesy komórkowe: metaboliczne, proliferacyjne czy związane z apoptozą. Badanie wychwytu substancji znakowanych radioizotopowo przez żywe komórki, a także procesów w nich zachodzących, stanowi ważny element przedklinicznych badań nad nowymi lekami, pozwalający określić profil farmakologiczny badanych związków w zakresie mechanizmu działania. Związki znakowane radioaktywnie wykorzystuje się też do oceny wchłaniania potencjalnego leku, jego rozmieszczenia, metabolizmu, wydalania, czy ewentualnej toksyczności.Celem pracy było przeprowadzenie wstępnych eksperymentów optymalizacyjnych metody radioizotopowej z użyciem scyntylatora w fazie stałej oraz sprawdzenie poprawności modelu badawczego komórkowego wychwytu znakowanego analogu 2-deoksy-D-[14C]glukozy.Oznaczono wpływ medium, DMSO, rosiglitazonu i cytochalazyny B na transport 2-deoksy-D-[14C]glukozy do komórek linii C2C12. Porównano sygnały dla dwóch analogów glukozy tj. znakowanych 3H i 14C oraz dla dwóch zawartości znakowanego 14C.Uzyskane wyniki z zastosowaniem [14C]2-DG świadczą o poprawności modelu eksperymentalnego oraz wysokiej jakości metody i możliwości jej wprowadzenia do oznaczania wpływu związków na transport glukozy do komórki.
abstract in English:
Radioisotope methods are considered the gold standard in preclinical studies of new compounds with potential pharmacological activity. They are used for testing and characterization of receptors and ligands, traceability of the various substances in the cell, and for testing the effect of chemical compounds on cellular processes: metabolic, proliferative, or associated with apoptosis. Specific uptake test applies a radioisotope-labelled substances by living cells and also processes that take place within the cells are an important part of the preclinical studies of new drugs that determine the pharmacological profile of the tested compounds in terms of mechanism of action and affinity for the receptor. Radiolabelled chemicals are also used to evaluate absorption potential of the drug, its distribution, metabolism, excretion or the possible toxicity.The aim of the study was to carry out preliminary experiments of radioizotope method optimization, using solid-phase scintillator and to validate the research model of cellular uptake of radiolabelled glucose analogue 2-deoxy-D-[14C]glucose. The impact of medium, DMSO, rosiglitazone and cytochalasin B on 2-deoxy-D-[14C]glucose transport into C2C12 cells was determined. Signals recorded for 3H- and 14C-labelled glucose analogues were compared. Moreover, the effect of different contents of 14C-labelled analogue was studied.The results obtained using 2-deoxy-D-[14C]glucose indicate the accuracy of experimental model and the high quality of proposed method, allowing for its implementation in studies on compounds affecting glucose transport into the cell.
keywords in Polish:
badania radioizotopowe, 2-deoksy-D-[14C]glukoza, wychwyt komórkowy, scyntylator fazy stałej