Wpływ wybranych inhibitorów szlaku biosyntezy cholesterolu na różnicowanie w miofibroblasty fibroblastów oskrzelowych pochodzących od osób chorych na astmę w hodowli in vitro

Wpływ wybranych inhibitorów szlaku biosyntezy cholesterolu na różnicowanie w miofibroblasty fibroblastów oskrzelowych pochodzących od osób chorych na astmę w hodowli in vitro

Communities & Collections

Wpływ wybranych inhibitorów szlaku biosyntezy cholesterolu na różnicowanie w miofibroblasty fibroblastów oskrzelowych pochodzących od osób chorych na astmę w hodowli in vitro

Bibliographic description

title:	Wpływ wybranych inhibitorów szlaku biosyntezy cholesterolu na różnicowanie w miofibroblasty fibroblastów oskrzelowych pochodzących od osób chorych na astmę w hodowli in vitro
alternative title:	Effects of selected inhibitors of cholesterol biosynthesis pathway on phenotypic transition of asthmatic bronchial fibroblasts into myofibroblasts in culture
author:	Paw Milena
reviewer:	Madeja Zbigniew , Michalik Marta
advisor:	Michalik Marta
date of submittion :	2012-06-29
language:	Polish
abstract in Polish:	Astmę oskrzelową cechuje złożona patogeneza. W jej przebieg zaangażowanych jest wiele rodzajów komórek: nabłonkowe, mezenchymalne oraz immunokompetentne. Obecność chronicznego stanu zapalnego w drogach oddechowych, nadprodukcja cytokin i czynników wzrostowych wpływa na przebudowę tego narządu, tzw. remodeling. Istotną rolę w rozwoju patologicznych zmian związanych z budową i funkcją oskrzeli odgrywa TGF-β₁, który stymuluje fibroblasty do zmiany fenotypu na pośredni pomiędzy komórkami mięśni gładkich, a fibroblastami. Komórki, które uległy zróżnicowaniu pod wpływem TGF-β₁ wykazują ekspresję białka α-aktyny mięśni gładkich (α-SMA) i określa się je jako miofibroblasty. Ich zwiększona liczba w stanach chorobowych prowadzi do nadprodukcji białek ECM, co skutkuje postępowaniem procesów zwłóknieniowych w tkance objętej stanem zapalnym.Celem niniejszej pracy była kontynuacja badań prowadzonych w ZBK na hodowlach in vitro i dotyczących wpływu lowastatyny na proces indukowanego TGF-β₁ różnicowania w miofibroblasty fibroblastów oskrzelowych pochodzących od chorych na astmę. Określono także wpływ innego inhibitora szlaku biosyntezy cholesterolu – kwasu zaragozowego A na FMT.Przeprowadzone badania potwierdziły hamujący FMT efekt lowastatyny i częściową odwracalność tego procesu wywołaną dodaniem mewalonianu do hodowli HBF. W wykonanym teście żywotności kwas zaragozowy nie wykazał cytotoksycznego wpływu na ludzkie fibroblasty oskrzelowe. Stwierdzono również wpływ kwasu zaragozowego A na hamowanie procesu różnicowania fibroblastów w miofibroblasty w komórkach astmatyków. Odnotowano także wpływ badanych związków na obniżenie ilości cholesterolu w komórkach HBF oraz na hamowanie translokacji ufosforylowanych białek P-Smad2 do jądra komórkowego. Wykonano eksperyment, którego wynik wskazuje na udział zarówno endogennego cholesterolu lub metabolitów pośrednich jego syntezy, jak i cholesterolu egzogennego, znajdującego się w medium hodowlanym, na indukowane TGF-β₁ różnicowanie HBF w miofibroblasty.Uzyskane wyniki jednoznacznie wskazują na rolę inhibitorów szlaku biosyntezy cholesterolu w procesie hamowania różnicowania fibroblastów pochodzących od osób chorych na astmę w miofibroblasty. Żeby wyjaśnić to zjawisko niezbędne są jednak dalsze badania.
abstract in English:	Bronchial asthma is characterized by complex pathogenesis and it is associated with many interactions between different types of cells, including epithelial, mesenchymal and inflammatory cells. Chronic inflammation in the airway and overproduction of proinflammatory cytokines and growth factors leads to the airway wall remodelling. TGF-β₁ , as a proinflammatory cytokine, plays an important role in the development of pathological changes associated with the airway wall remodelling. This growth factor stimulates fibroblasts to differentiation into myofibroblasts. These cells have a phenotype intermediate between fibroblasts and smooth muscle cells and express the protein α-smooth muscle actin (α-SMA). Increased number of α-SMA-positive cells leads to the overproduction of extracellular matrix proteins and its accumulation in airway walls, promoting fibrosis.The aim of this study was continuation of studies on the effect of lovastatin on TGF-β₁-induced differentiation of fibroblasts from patients with bronchial asthma into myofibroblasts. Also examined the impact of another inhibitor of cholesterol biosynthesis – zaragozic acid A, on fibroblasts from ashmatic patients to myofibroblasts transition.The results confirm the inhibitory effects of lovastatin on TGF-β-induced FMT and partially restored this process by mevalonate. Zaragozic acid A exhibits the minimal cytotoxic effects on the cell viability but inhibits the TGF-β-induced differentiation of fibroblasts from asthmatic into myofibroblasts. After treatment with the investigated inhibitors the level of cholesterol in human bronchial fibroblasts is decreased and the nuclear translocation of P-Smad2 is inhibited. Performed an experiment whose result indicates the participation of endogenous cholesterol or intermediate metabolites of its synthesis on the TGF-β₁-induced FMT, and excluding the participation of exogenous cholesterol, which is located in the culture medium, on the FMT.The results clearly indicate the role of inhibitors of cholesterol biosynthesis pathway in the inhibition of differentiation of fibroblasts into myofibroblasts. To explain this phenomenon is necessary for further studies.
keywords in Polish:	astmaludzkie fibroblasty oskrzelowetransformujący czynnik wzrostowy betakwas zaragozowy Alowastatyna
keywords in English:	asthma\nhuman bronchial fibroblasts\ntransforming growth factor beta\nzaragozic acid A\nlovastatin
affiliation:	Wydział Biologii
type:	master work