Wyprowadzenie i wstępna charakterystyka stabilnych genetycznie linii hodowlanych z populacji Chlamydomonas reinhardtii CW 15 opornych na wysokie stężenia Cu2+.
Wyprowadzenie i wstępna charakterystyka stabilnych genetycznie linii hodowlanych z populacji Chlamydomonas reinhardtii CW 15 opornych na wysokie stężenia Cu2+.
Wyprowadzenie i wstępna charakterystyka stabilnych genetycznie linii hodowlanych z populacji Chlamydomonas reinhardtii CW 15 opornych na wysokie stężenia Cu2+.
alternative title:
Isolation and preliminary characterization of a genetically stable breeding strains from the population of Chlamydomonas reinhardtii CW15 resistant to Cu2+ excess.
author:
Łucka Katarzyna
reviewer:
Waloszek Andrzej , Malec Przemysław
advisor:
Waloszek Andrzej
date of submittion
:
2011-06-30
abstract in English:
This paper was aimed at obtaining genetically stable breeding strains from the four initial cultures of heterogeneous mutants of Chlamydomonas reinhardtii CW 15 (Cu, Dł, Kr, N), with subsequent compilation of their characterization. Isolation of a pure strain consisted in establishing a culture being the progeny of a single cell. The experiment was performed with a modified method of series of dilutions on multi-hole plates, and ended in obtaining three lines from the aforesaid pollutions (except Kr – two). A preliminary characterization of the cultures obtained was aimed at determining the parameters of photosynthesis, viz. maximum fluorescence after darkroom adaptation and maximum quantum efficiency of photosystem II at various Cu2+ concentrations. Basing upon an analysis of those results, further experiment was performed on Cu1, Dł2, Kr1 and N3 because they were characterized with the maximum survival rate and a relatively low value of quantities under measurement. Afterwards, investigations were based upon the determination of contents of photosynthetic dyes, proliferation rate as well as breathing intensity and photosynthesis in cultures at three different concentrations of copper ions and for the reference sample. The results proved that among the four populations analyzed more accurately, most tolerant to copper was Cu1 culture. This results from the adaptation of algae to stressful conditions, due to the development of genetically conditioned resistance. Other cultures proved to be more sensitive. Clear effects of copper are corroborated mainly by a decreased number of cells at a concentration of 64µM Cu2+. An evident negative effect of the metal is observed at a concentration 640µM Cu2+.
abstract in other languages:
Celem tej pracy było uzyskanie z czterech wyjściowych hodowli heterogenicznych mutantów Chlamydomonas reinhardtii CW15 (Cu, Dł, Kr, N) stabilnych genetycznie linii hodowlanych i dokonanie ich wstępnej charakterystyki. Wyprowadzenie czystej linii polegało na założeniu hodowli która stanowiła potomstwo pojedynczej komórki. Eksperyment przeprowadzono zmodyfikowaną metodą serii rozcieńczeń na płytkach wielodołkowych, uzyskując po trzy linie z wyżej wymienionych populacji (za wyjątkiem Kr – dwie). Wstępna charakterystyka uzyskanych hodowli dotyczyła wyznaczenia parametrów fotosyntezy: fluorescencji maksymalnej po adaptacji ciemniowej i maksymalnej wydajności kwantowej fotosystemu II w różnych stężeniach Cu2+. Na podstawie analizy tych wyników do dalszych doświadczeń wybrano Cu1, Dł2, Kr1 i N3 które cechowała największa przeżywalność i relatywnie wysoka wartość mierzonych wielkości. Dalsze badania opierały się na wyznaczeniu zawartości barwników fotosyntetycznych, szybkości namnażania oraz intensywności oddychania i fotosyntezy w hodowlach w trzech różnych stężeniach jonów miedzi oraz w kontroli. wyniki dowiodły, że spośród czterech dokładniej analizowanych populacji, hodowla Cu1 była najbardziej tolerancyjna na miedź. Jest to skutek adaptacji glonów do warunków stresu, dzięki wykształceniu uwarunkowanej genetycznie oporności. Pozostałe hodowle okazały się bardziej wrażliwe. Wyraźne skutki działania miedzi są widoczne przede wszystkim w zmniejszonej liczbie komórek przy stężeniu 64µM Cu2+. Ewidentna szkodliwość metalu obserwowana jest przy stężeniu 640µM Cu2+.
keywords in English:
Characterization of Chlamydomonas reinhardtii CW15