W dniach od 2 kwietnia do 5 kwietnia 2024 r. prowadzone będą prace związane z wdrożeniem nowej wersji systemu Repozytorium UJ. Nie będzie możliwe wprowadzanie nowych informacji do repozytorium. Za utrudnienia przepraszamy.
Porównanie aktywności mitochondriów plemników trzech szczepów mieszańcowych myszy laboratoryjnej (CBA, CBA-B7.BR-Ydel, CBA-B14.BR) - metoda fluorescencyjna.
wariant tytułu:
Comparison of sperm mitochondrial activity of three strains of laboratory mice (CBA, CBA-B7.BR-Ydel, CBA, B14.BR) - a fluorescent method
autor:
Kucia Marcin
recenzent:
Styrna Józefa , Witaliński Wojciech
promotor:
Witaliński Wojciech
data obrony
:
2011-07-13
język:
polski
abstrakt w j. polskim:
W pracy przedstawione zostały różne metody barwień mitochondriów, ze szczególnym uwzględnieniem metod fluorescencyjnych. Większość barwników stosowanych w metodach fluorescencyjnych zwiększa wielokrotnie emisję światła widzialnego w przypadku, gdy mitochondria funkcjonują i wytwarzają stromy gradient protonowy poprzez wewnętrzną błonę np. Rodamina 123. Istnieją też barwniki, takie jak Pyronina Y, które są rzadziej używane jako znaczniki mitochondriów ze względu na ich dużą toksyczność lub małą przydatność do dalszych badań. Omówiona została także metodyka badań ultrastruktury mitochondriów oraz dwie reakcje histoenzymatyczne.W części doświadczalnej pracy szukano odpowiedzi na pytanie, czy aktywność mitochondriów plemników trzech szczepów myszy laboratoryjnej różniących się ruchliwością plemników jest taka sama, czy też występują różnice pomiędzy szczepami, które można byłoby skorelować z ruchliwością. Do eksperymentu użyto barwienia rodaminą 123 oraz plemników szczepów CBA, CBA-B14.BR i CBA-B7.BR-Ydel. Z wcześniejszych badań wiadomo, że plemniki szczepu z delecją charakteryzują się znacznie obniżoną przeżywalnością i ruchliwością. Przeprowadzone barwienia uwidoczniły niewielkie różnice morfologiczne pomiędzy plemnikami badanych szczepów, jednak nie jest możliwe przy pomocy tej metody potwierdzenie tezy, że mitochondria szczepu CBA-B7.BR-Ydel posiadają mniejszą aktywność niż w innych szczepach.
abstrakt w j. angielskim:
The paper presents the various methods of staining of mitochondria, with particular emphasis on methods of fluorescence. Most of the dyes used in fluorescent methods, increases the emission of visible light several times when the mitochondria function and produce a steep proton gradient through the inner membrane for example: rhodamine 123. There are dyes, such as Pyronina Y, which are not commonly used as markers of mitochondria due to their high toxicity or low suitability for further research. The methodology of ultrastructure research was also discussed and two histoenzymatic reactions.In the experimental part of paper looked for to answer the question whether the sperm mitochondrial activity three strains of laboratory mice differing in sperm motility is the same, or whether there are differences between strains that could be correlated with their mobility.The experiment uses the dye rhodamine 123 and sperm of strains CBA, B14.BR and CBA-CBA-B7.BR-Ydel. From previous studies it is known that sperm strain with a deletion have a significantly reduced survival and motility. Conducted staining revealed the slight morphological differences between the sperm tested strains, but it is not possible using this method to confirm the thesis that the mitochondria of strain CBA-B7.BR-Ydel have less activity than other strains.