Characterization of lipophilicity by in vitro method of new melanogenesis inhibitors in the group of cinnamic acid derivatives

W ramach niniejszej pracy o charakterze badawczym oszacowano lipofilowość przy pomocy metody chromatograficznej dla 34 pochodnych kwasu cynamonowego. Badane substancje są potencjalnymi inhibitorami melanogenezy. Chromatografia cienkowarstwowa wykonana została na odwróconych fazach RP-18. Metoda opiera się na rozdziale substancji między fazę stacjonarną (modyfikowany żel krzemionkowy) oraz fazę ruchomą (metanol w połączeniu z buforem fosforanowym). Parametrem opisującym właściwości lipofilowe jest w tej metodzie współczynnik RM0. W ramach prac eksperymentalnych przygotowano:•badane substancje – odważono próbki i rozpuszczono je w metanolu; •bufor fosforanowy;•fazy ruchome o 5 różnych stężeniach metanolu – 65%, 75%, 80%, 90%, 95%;•płytki chromatograficzne poprzez nałożenie na nie roztworów badanych substancji.Kolejno na podstawie rozwiniętych chromatogramów zostały obliczone wartości Rf oraz dalej wartości parametrów RM dla wszystkich warunków eksperymentalnych. Następnym etapem było wykonanie wykresów zależności RM od stężenia metanolu w układach rozwijających dla każdego badanego związku. Eksperyment był wykonywany w dwóch powtórzeniach dla każdego związku, aby zapewnić rzetelność wyników oraz wykluczyć błędy różnego pochodzenia. Uzyskane funkcje RM = f(Cmetanol) wykazują liniowość oraz wysokie współczynniki korelacji. Otrzymane zależności RM od stężenia metanolu w fazie mobilnej zostały ekstrapolowane do zerowej wartości metanolu, dzięki czemu otrzymano wartości RM0. Wyznaczone wartości RM0 dla badanych związków mieściły się w przedziale od 1,06 do 3,82. Na podstawie przeprowadzonych prac można wysunąć wnioski, że badane związki mogą charakteryzować się dobrym przenikaniem przez kolejne warstwy skóry po podaniu zewnętrznym i z powodzeniem docierać do miejsca działania tj. żywych warstw naskórka.

Within this research work, the lipophilicity was estimated with the use of the chromatographic method for 34 derivatives of cinnamic acid. The tested substances are potential melanogenesis inhibitors. Thin layer chromatography was performed on the reversed phase RP-18. The method is based on the separation of substances between the stationary phase (modified silica gel) and the mobile phase (methanol with a phosphate buffer). The parameter describing the lipophilic properties in this method is the RM0 coefficient.As part of the experimental work, the following was prepared:•test substances - samples were weighed and dissolved in methanol;•phosphate buffer;•mobile phases with 5 different methanol concentrations - 65%, 75%, 80%, 90%, 95%;•chromatographic plates by applying the solutions of the tested substances.On the basis of the developed chromatograms, the Rf values and further the values of RM parameter for all experimental conditions were calculated. The next step was to plot the graph of RM dependence on the concentration of methanol in the mobile phases for each tested compound.The experiment was performed in duplicate for each compound to ensure the reliability of the results and to exclude errors of various origins. The obtained functions RM = f (Cmethanol) show linearity and high correlation coefficients. The obtained functions of RM dependencies on the concentration of methanol in the mobile phase were extrapolated to the zero value of methanol, according to which RM0 values were obtained. The determined RM0 values for the tested compounds ranged from 1.06 to 3.82. On the basis of the conducted studies, it can be concluded that the tested compounds can be characterized by good penetration through subsequent layers of the skin after topical administration and successfully reach the place of action, i.e. the living layers of the epidermis.