Research on the development of method for the determination of creatinine using the digital imaging system

W pracy opisano zastosowanie oznaczania kreatyniny (z krwi, surowicy i moczu) w diagnostyce przewlekłej choroby nerek (PChN) oraz przedstawiono, zaczerpnięte z literatury, metody oznaczania tej substancji. W dalszej części pracy opisano badania nad opracowaniem metody pozwalającej na wyznaczanie stężenia kreatyniny z wykorzystaniem systemu cyfrowego obrazowania – PhotoMetrix Pro. W pierwszym etapie badań wybrano najlepsze warunki prowadzenia reakcji będącej podstawą oznaczenia oraz kanał aplikacji PhotoMetrix Pro. Podczas badań optymalizacyjnych dobrano czas oraz temperaturę stosowaną w trakcie reakcji pomiędzy kreatyniną, a kwasem pikrynowym, w środowisku zasadowym. Następnie dobrano stężenia kwasu pikrynowego i wodorotlenku sodu. Dla otrzymanych wyników wyznaczono parametry walidacyjne: odchylenie standardowe, współczynnik zmienności, granicę wykrywalności oraz granicę oznaczalności. Zaproponowana metoda charakteryzuje się zadowalającą precyzją i dobrą dokładnością.

The thesis describes the use of creatinine determination (from blood, serum and urine) in the diagnosis of chronic kidney disease (CKD) and presents methods of the determination of this substance taken from the literature. The work describes also the development of method for the determination of creatinine using the digital imaging system – PhotoMetrix Pro. In the first part of the research, the best reaction conditions on which the assay is based were selected and the PhotoMetrix Pro application channel was chosen. During optimization studies, the time and temperature used for the reaction between creatinine and picric acid in an alkaline environment were selected. Subsequently, the concentrations of picric acid and sodium hydroxide were chosen. Validation parameters of the method such as : standard deviation, coefficient of variation, limit of detection and limit of quantification were calculated. The proposed method is characterized by satisfactory precision and good accuracy.