The effects of elafibranor on the Smad signalling activation in TGF-β1-stimulated human bronchial fibroblasts derived from asthmatic patients

Astma jest to choroba niezakaźna atakująca drogi układu oddechowego. Towarzyszy jej wiele objawów, które są wynikiem chronicznego stanu zapalnego i przebudowy ścian oskrzeli. Jednym z kluczowych procesów przebudowy ścian dróg oddechowych jest włóknienie podnabłonkowe. W tym procesie następuje zmiana fenotypowa fibroblastów w miofibroblasty (FMT) pod wpływem działania TGF-β. Cząsteczka ta aktywuje wiele szlaków wewnątrzkomórkowych, w tym kanoniczny szlak sygnalizacyjny białek Smad, które pełnią funkcję czynnika transkrypcyjnego dla genów profibrotycznych. PPAR to jądrowe receptory steroidowe, których aktywacja przez odpowiednie ligandy może hamować proces FMT. Opracowano związki, które aktywują jednocześnie więcej niż jedną izoformę PPAR. Do tych ligandów należy elafibranor (Ela), który jest aktywatorem dwóch z trzech izoform PPAR (tzw. duo-PPAR). Celem pracy było określenie wpływu Ela na aktywację ścieżki sygnalizacyjnej białek Smad w populacjach ludzkich fibroblastów oskrzelowych (HBFs) izolowanych od astmatyków stymulowanych TGF-β1. Wykonując barwienia immunocytofluorescencyjne określono wewnątrzkomórkową lokalizację oraz poziom ufosforylowania białka Smad2 w 5 populacjach HBFs. Uzyskane wyniki wykazały, że w badanych populacjach Ela nie hamuje dojądrowej translokacji i fosforylacji białek Smad2 wywołanej przez TGF-β.

Asthma is a non-infectious disease that attacks respiratory tract. Many symptoms are related to the chronic inflammation and remodelling of the bronchial wall. One of the key processes in the bronchial remodelling is the subepithelial fibrosis. This process involves a phenotypic change of fibroblasts into myofibroblasts (FMT) and is stimulated by TGF-β. TGF-β activates many intracellular pathways, including canonical Smad-mediated signalling. Smads act as a transcription factor for many profibrotic genes. PPARs are nuclear, steroid receptors, activated by appropriate ligands, which present an inhibitory effect on the FMT process. The new generation ligands activating more than one PPAR isoform simultaneously have been developed. One of them is elafibranor, which is an activator of two PPAR isoforms (duo-PPAR). The aim of this work was to investigate the effects of elafibranor on the Smad signalling activation in human bronchial fibroblasts (HBFs) derived from asthmatic patients stimulated by TGF-β1. By performing immunocytofluorescence staining the intracellular localization and the phosphorylation level of Smad2 protein in 5 HBFs populations were determined. The results showed that Ela does not inhibit TGF-β-induced intranuclear translocation and phosphorylation of Smad2 protein in tested populations of HBFs.