Wykorzystanie mikroiniekcji do badania przepuszczalności błon biologicznych

master
dc.abstract.enBiological membrane permeability, especially nuclear envelope permeability, is extensively studied subject nowadays. There are several different models of macromolecular diffusion through nuclear pore complexes. Many articles indicates that there is 60 kDa size threshold, beyond which permeability decreases rapidly. In this study microinjection was used to inject fluorescent dextran into cell nucleus to compare nuclear membrane permeability for macromolecules with molecular weights of 10 and 70 kDa. Measurements were made using wide field fluorescence microscopy. In addition, efficiency and cells survival rate were compared for manual and semi-automatic microinjection. The rate of dextran outflow from the nucleus was shown to depend on its molecular weight. The higher dextran molecular weight, the slower is its transport through nuclear envelope. However, in both cases, visible outflow from the nucleus was observed, which does not confirm the existence of 60 kDa threshold. Two mathematical models were proposed to describe the obtained experimental data. The difference between both dextrans indicate differences in the mechanisms of their transport through the nuclear membrane.pl
dc.abstract.plPrzepuszczalność błon biologicznych, a w szczególności błon jądrowych, jest szeroko badanym zagadnieniem. Istnieją różne modele transportu makromolekuł przez pory jądrowe. Wiele prac wskazuje na istnienie ostrego progu przepuszczalności dla cząsteczek większych od 60 kDa.W niniejszej pracy wykorzystano mikroiniekcję do wprowadzenia fluorescencyjnego dekstranu do jąder komórkowych w celu porównania przepuszczalności błony jądrowej dla cząsteczek o masach molekularnych 10 i 70 kDa. Pomiary wykonano stosując mikroskopię fluorescencyjną szerokiego pola. Dodatkowo w przedstawionej pracy porównano metodę mikroiniekcji manualnej i półautomatycznej pod względem skuteczności nastrzykiwania i przeżywalności komórek.Pokazano, że szybkość wypływu dekstranu z jądra zależy od jego masy. Im większa masa dekstranu tym transport przez błonę jądrową jest wolniejszy. Jednak w przypadku obu dekstranów zaobserwowano ich wyraźny wypływ z jąder, co nie potwierdza istnienia ostrego progu przepuszczalności 60 kDa. Zaproponowano dwa modele matematyczne do opisu otrzymanych danych eksperymentalnych. Zauważone różnice w przebiegu krzywych dla obu mas dekstranów wskazują na różnice w mechanizmach ich transportu przez błonę jądrową.pl
dc.affiliationWydział Fizyki, Astronomii i Informatyki Stosowanejpl
dc.areaobszar nauk przyrodniczychpl
dc.contributor.advisorRajfur, Zenonpl
dc.contributor.authorHajduk, Joannapl
dc.contributor.departmentbycodeUJK/WFAISpl
dc.contributor.reviewerRajfur, Zenonpl
dc.contributor.reviewerTargosz-Korecka, Marta - 102459 pl
dc.date.accessioned2021-10-28T21:47:26Z
dc.date.available2021-10-28T21:47:26Z
dc.date.submitted2021-09-22pl
dc.fieldofstudybiofizykapl
dc.identifier.apddiploma-150205-278655pl
dc.identifier.projectAPD / Opl
dc.identifier.urihttps://ruj.uj.edu.pl/xmlui/handle/item/282211
dc.languagepolpl
dc.subject.enMicroinjection, fluorescence microscopy, dextran, fibroblasts, nuclear pores, permeability, biological membranes, nucleuspl
dc.subject.plMikroiniekcja, mikroskopia fluorescencyjna, dekstran, fibroblasty, pory jądrowe, przepuszczalność, błony biologiczne, jądro komórkowepl
dc.titleWykorzystanie mikroiniekcji do badania przepuszczalności błon biologicznychpl
dc.title.alternativeMicroinjection in studies on the permeability of biological membranespl
dc.typemasterpl
dspace.entity.typePublication
dc.abstract.enpl
Biological membrane permeability, especially nuclear envelope permeability, is extensively studied subject nowadays. There are several different models of macromolecular diffusion through nuclear pore complexes. Many articles indicates that there is 60 kDa size threshold, beyond which permeability decreases rapidly. In this study microinjection was used to inject fluorescent dextran into cell nucleus to compare nuclear membrane permeability for macromolecules with molecular weights of 10 and 70 kDa. Measurements were made using wide field fluorescence microscopy. In addition, efficiency and cells survival rate were compared for manual and semi-automatic microinjection. The rate of dextran outflow from the nucleus was shown to depend on its molecular weight. The higher dextran molecular weight, the slower is its transport through nuclear envelope. However, in both cases, visible outflow from the nucleus was observed, which does not confirm the existence of 60 kDa threshold. Two mathematical models were proposed to describe the obtained experimental data. The difference between both dextrans indicate differences in the mechanisms of their transport through the nuclear membrane.
dc.abstract.plpl
Przepuszczalność błon biologicznych, a w szczególności błon jądrowych, jest szeroko badanym zagadnieniem. Istnieją różne modele transportu makromolekuł przez pory jądrowe. Wiele prac wskazuje na istnienie ostrego progu przepuszczalności dla cząsteczek większych od 60 kDa.W niniejszej pracy wykorzystano mikroiniekcję do wprowadzenia fluorescencyjnego dekstranu do jąder komórkowych w celu porównania przepuszczalności błony jądrowej dla cząsteczek o masach molekularnych 10 i 70 kDa. Pomiary wykonano stosując mikroskopię fluorescencyjną szerokiego pola. Dodatkowo w przedstawionej pracy porównano metodę mikroiniekcji manualnej i półautomatycznej pod względem skuteczności nastrzykiwania i przeżywalności komórek.Pokazano, że szybkość wypływu dekstranu z jądra zależy od jego masy. Im większa masa dekstranu tym transport przez błonę jądrową jest wolniejszy. Jednak w przypadku obu dekstranów zaobserwowano ich wyraźny wypływ z jąder, co nie potwierdza istnienia ostrego progu przepuszczalności 60 kDa. Zaproponowano dwa modele matematyczne do opisu otrzymanych danych eksperymentalnych. Zauważone różnice w przebiegu krzywych dla obu mas dekstranów wskazują na różnice w mechanizmach ich transportu przez błonę jądrową.
dc.affiliationpl
Wydział Fizyki, Astronomii i Informatyki Stosowanej
dc.areapl
obszar nauk przyrodniczych
dc.contributor.advisorpl
Rajfur, Zenon
dc.contributor.authorpl
Hajduk, Joanna
dc.contributor.departmentbycodepl
UJK/WFAIS
dc.contributor.reviewerpl
Rajfur, Zenon
dc.contributor.reviewerpl
Targosz-Korecka, Marta - 102459
dc.date.accessioned
2021-10-28T21:47:26Z
dc.date.available
2021-10-28T21:47:26Z
dc.date.submittedpl
2021-09-22
dc.fieldofstudypl
biofizyka
dc.identifier.apdpl
diploma-150205-278655
dc.identifier.projectpl
APD / O
dc.identifier.uri
https://ruj.uj.edu.pl/xmlui/handle/item/282211
dc.languagepl
pol
dc.subject.enpl
Microinjection, fluorescence microscopy, dextran, fibroblasts, nuclear pores, permeability, biological membranes, nucleus
dc.subject.plpl
Mikroiniekcja, mikroskopia fluorescencyjna, dekstran, fibroblasty, pory jądrowe, przepuszczalność, błony biologiczne, jądro komórkowe
dc.titlepl
Wykorzystanie mikroiniekcji do badania przepuszczalności błon biologicznych
dc.title.alternativepl
Microinjection in studies on the permeability of biological membranes
dc.typepl
master
dspace.entity.type
Publication
Affiliations

* The migration of download and view statistics prior to the date of April 8, 2024 is in progress.

Views
33
Views per month
Views per city
Chandler
5
Krakow
5
Wroclaw
5
Paris
4
Warsaw
2
Dublin
1
Nakło nad Notecią
1
New York
1

No access

No Thumbnail Available