Simple view
Full metadata view
Authors
Statistics
Badanie zahamowania ekspresji aminotransferazy fosfoseryny w liniach komórkowych nowotworów piersi i płuc
nowotwory piersi i płuc, szlak biosyntezy seryny, PSAT1, aminotransferaza fosfoseryny, shRNA
breast and lung cancers, serine biosynthesis pathway, PSAT1, phosphoserine aminotransferase, shRNA
Komórki nowotworowe charakteryzują się odmiennymi od komórek prawidłowych zdolnościami, takimi jak umiejętność unikania apoptozy czy nieograniczony potencjał mitotyczny. Szczególnie ważną cechą jest zdolność do przeprogramowania metabolizmu komórki. Jedną z adaptacji metabolicznej komórek nowotworowych jest zwiększenie biosyntezy seryny. Ścieżka ta powiązana jest z glikolizą i przeprowadzana jest za pośrednictwem trzech enzymów: dehydrogenazy 3-fosfoglicerynianowej (PHGDH), aminotransferazy fosfoseryny (PSAT1) i fosfatazy fosfoseryny (PSPH). Zahamowanie ekspresji któregoś z tych enzymów może umożliwić badanie wpływu biosyntezy seryny na rozwój komórek nowotworowych. W przedstawionej pracy sprawdzono zahamowanie ekspresji PSAT1 na poziomie transkrypcji i translacji przy użyciu linii komórkowych nowotworów piersi (MDA-MB-468) i płuc (H1792, H1944 i H1299) po transdukcji wektorami lentiwirusowymi z shRNA (small hairpin RNA). Analiza poziomu mRNA metodą PCR w czasie rzeczywistym oraz poziom białka oznaczony przy użyciu metody Western Blot wskazały na silne zahamowanie ekspresji PSAT1 w komórkach transdukowanych wektorami z sekwencją shRNA A i, w przypadku nowotworów płuc, zróżnicowanym poziomem inhibicji przy użyciu shRNA D. Wyniki te wskazują, że zastosowanie shRNA do hamowania biosyntezy seryny jest skuteczne. Dalsze badania z wykorzystaniem linii komórkowych z wyciszoną ekspresją PSAT1 pozwolą na określenie roli ścieżki biosyntezy seryny we wzroście i przeżywaniu komórek nowotworowych.
Cancer cells are characterized by different abilities from normal cells such as avoidance of apoptosis or unlimited mitotic potential. Particularly important trait of cancer cells is reprogramming cell’s metabolism. One of metabolic adaptation of cancer cells is increased biosynthesis of serine. This path is related with glycolysis and it is executed by three enzymes: phosphoglycerate dehydrogenase (PHGDH), phosphoserine aminotransferase (PSAT1) and phosphoserine phosphatase (PSPH). Expression inhibition of any of those enzymes would allow to examine influence of serine biosynthesis on cancer development. In this study was tested inhibition of PSAT1 at the transcriptional and translational level using breast (MDA-MB-468) and lung (H1792, H1944 and H1299) cancer lines after transduction via lentiviral vectors with shRNA (small hairpin RNA) against PSAT1. Analysis of mRNA levels via Real Time PCR and protein levels via Western Blot proved strong inhibition of PSAT1 in cells after transduction via vectors with shRNA A sequence and varied inhibition using shRNA D in lung cancers. Those results shows that using shRNA to inhibit serine biosynthesis is effective. Further research with usage of cell lines with inhibited PSAT1 expression would allow to define role of serine biosynthesis pathway in growth and survival of cancer cells.
dc.abstract.en | Cancer cells are characterized by different abilities from normal cells such as avoidance of apoptosis or unlimited mitotic potential. Particularly important trait of cancer cells is reprogramming cell’s metabolism. One of metabolic adaptation of cancer cells is increased biosynthesis of serine. This path is related with glycolysis and it is executed by three enzymes: phosphoglycerate dehydrogenase (PHGDH), phosphoserine aminotransferase (PSAT1) and phosphoserine phosphatase (PSPH). Expression inhibition of any of those enzymes would allow to examine influence of serine biosynthesis on cancer development. In this study was tested inhibition of PSAT1 at the transcriptional and translational level using breast (MDA-MB-468) and lung (H1792, H1944 and H1299) cancer lines after transduction via lentiviral vectors with shRNA (small hairpin RNA) against PSAT1. Analysis of mRNA levels via Real Time PCR and protein levels via Western Blot proved strong inhibition of PSAT1 in cells after transduction via vectors with shRNA A sequence and varied inhibition using shRNA D in lung cancers. Those results shows that using shRNA to inhibit serine biosynthesis is effective. Further research with usage of cell lines with inhibited PSAT1 expression would allow to define role of serine biosynthesis pathway in growth and survival of cancer cells. | pl |
dc.abstract.pl | Komórki nowotworowe charakteryzują się odmiennymi od komórek prawidłowych zdolnościami, takimi jak umiejętność unikania apoptozy czy nieograniczony potencjał mitotyczny. Szczególnie ważną cechą jest zdolność do przeprogramowania metabolizmu komórki. Jedną z adaptacji metabolicznej komórek nowotworowych jest zwiększenie biosyntezy seryny. Ścieżka ta powiązana jest z glikolizą i przeprowadzana jest za pośrednictwem trzech enzymów: dehydrogenazy 3-fosfoglicerynianowej (PHGDH), aminotransferazy fosfoseryny (PSAT1) i fosfatazy fosfoseryny (PSPH). Zahamowanie ekspresji któregoś z tych enzymów może umożliwić badanie wpływu biosyntezy seryny na rozwój komórek nowotworowych. W przedstawionej pracy sprawdzono zahamowanie ekspresji PSAT1 na poziomie transkrypcji i translacji przy użyciu linii komórkowych nowotworów piersi (MDA-MB-468) i płuc (H1792, H1944 i H1299) po transdukcji wektorami lentiwirusowymi z shRNA (small hairpin RNA). Analiza poziomu mRNA metodą PCR w czasie rzeczywistym oraz poziom białka oznaczony przy użyciu metody Western Blot wskazały na silne zahamowanie ekspresji PSAT1 w komórkach transdukowanych wektorami z sekwencją shRNA A i, w przypadku nowotworów płuc, zróżnicowanym poziomem inhibicji przy użyciu shRNA D. Wyniki te wskazują, że zastosowanie shRNA do hamowania biosyntezy seryny jest skuteczne. Dalsze badania z wykorzystaniem linii komórkowych z wyciszoną ekspresją PSAT1 pozwolą na określenie roli ścieżki biosyntezy seryny we wzroście i przeżywaniu komórek nowotworowych. | pl |
dc.affiliation | Wydział Biochemii, Biofizyki i Biotechnologii | pl |
dc.area | obszar nauk przyrodniczych | pl |
dc.contributor.advisor | Łoboda, Agnieszka - 130081 | pl |
dc.contributor.author | Bogacz, Tomasz | pl |
dc.contributor.departmentbycode | UJK/WBBB | pl |
dc.contributor.reviewer | Łoboda, Agnieszka - 130081 | pl |
dc.contributor.reviewer | Kachamakova-Trojanowska, Neli | pl |
dc.date.accessioned | 2020-07-26T22:37:58Z | |
dc.date.available | 2020-07-26T22:37:58Z | |
dc.date.submitted | 2016-07-04 | pl |
dc.fieldofstudy | biotechnologia | pl |
dc.identifier.apd | diploma-105919-175768 | pl |
dc.identifier.project | APD / O | pl |
dc.identifier.uri | https://ruj.uj.edu.pl/xmlui/handle/item/212254 | |
dc.language | pol | pl |
dc.subject.en | breast and lung cancers, serine biosynthesis pathway, PSAT1, phosphoserine aminotransferase, shRNA | pl |
dc.subject.pl | nowotwory piersi i płuc, szlak biosyntezy seryny, PSAT1, aminotransferaza fosfoseryny, shRNA | pl |
dc.title | Badanie zahamowania ekspresji aminotransferazy fosfoseryny w liniach komórkowych nowotworów piersi i płuc | pl |
dc.title.alternative | Evaluation of inhibition of phosphoserine aminotransferase in breast and lung cancer cell lines | pl |
dc.type | licenciate | pl |
dspace.entity.type | Publication |